肝素钠效价检测方法.doc

Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuse螂肝素钠效价检测方法袀衿试剂:羊血浆(冰冻保存)、%生理盐水、%CaCl2(用生理盐水配置)、8%柠檬酸钠溶液、8IU∕mg肝素钠标准溶液。肇膄 待检样品溶液的配置:精确称取肝素钠固体待检样品Mmg,%生理盐水定容至100ml,再取Vml定容至25ml即得待检样品溶液,冷藏保存。莀估计M及V的计算公式为:样品估计效价×MV∕100=25×8蚀估算时V只尽量小于10且取整数,从而计算出M值。袄节检测方法:将恒温水域调制37℃恒温,取出冰冻羊血浆,融化,并过滤,待用。取2组10只试管,分别加入标样110ul、120ul……200ul,然后每管加入8%柠檬酸钠溶液20ul、%,另一组加入待检样品溶液110ul、120ul……200ul,同样每管加入8%柠檬酸钠溶液20ul、%。并将每只试管盖好管盖,倒转3—4次混匀,使内壁湿润,垂直放入37℃水域1h。1h后取出各管,检查各管的凝固程度,并记录确定标样及待检样的1∕2凝固点及体积。蝿凝固程度标准:莀①完全凝固:溶液完全凝固,倒转试管并猛敲一下时,凝块不从管壁脱落。羅②3∕4凝固:溶液完全凝固,但当猛敲一下时,凝块能从管壁脱落。薅③1∕2凝固:大约一半体积的溶液凝固。蒃④1∕4凝固:少量溶液凝固。袆⑤0凝固:溶液悟凝固现象。肇若相邻两管跳过1∕2凝固点则1∕2凝固点的计算公式为螃V=V2-(V2-V1)×(-S1)∕(S2-S1)袂(S1:小凝固度;S2:大凝固度;V1:相邻两管大凝固度加入的微升数;V2:相邻两管小凝固度加入的微升数。)蚇待检样品效价计算公式:螄F=待检样品估计效价×标品1∕2凝固点微升数÷样品1∕2凝固点微升数袂芁注意事项:莇 实验室操作环境必须控制在30℃以下。袅,需检测羊血浆是否能够正常使用。取试管一只,%CaCl2及过滤后的羊血浆1ml,盖好管盖,倒转3—4次混匀,使内壁湿润,垂直放入37℃水域5min,5min后检查血浆是否凝固,如血浆凝固则可使用,未凝固则不能使用。膄 如在检测过程中,标样的1∕2凝固点高于200ul,则需重新调整羊血浆的1∕2凝固点。方法如下:取3组各10只试管螁组一:**********肈标样110120130140150160170180190200ul羇8%%:**********蚅标样110120130140150160170180190200ul蕿8%%:**********荿标样110120130140150160170180190200ul袇8%%.