银屑病中细胞凋亡相关基因bcl.doc

银屑病中细胞凋亡相关基因bcl本文从网络收集而来,上传到平台为了帮到更多的人,如果您需要使用本文档,请点击下载按钮下载本文档(有偿下载),另外祝您生活愉快,工作顺利,万事如意!银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、fas、bax的检测摘要为了探讨细胞凋亡相关基因bcl-2、fas、bax在银屑病发病中的意义,采用免疫组化abc法、sabc法检测了这几种基因在15例银屑病组织中的表达。结果发现银屑病的角质形成细胞中抑凋亡基因bcl-2几乎不表达,促凋亡基因fas、bax阳性表达。提示促凋亡基因fas、bax在银屑病中发病起重要作用,而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。关键词银屑病、bcl-2基因、fas基因、bax基因。银屑病的发病机理尚不明确,角质形成细胞异常增生和角化不全是银屑病的主要病理改变,以往对这方面的研究主要集中在免疫学和生化学方面。近年来银屑病与细胞凋亡的关系逐渐受到越来越多学者的重视。国外有学者报道银屑病表皮中角质形成细胞凋亡异常增多。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因fas、bax是现今研究较多、较重要的几个细胞凋亡相关基因。为了探讨这几种基因在银屑病发病中的意义,我们采用免疫组化方法检测了银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、fas及bax。 1材料和方法 :采用1994-1997年我院保存的石蜡包埋组织块。寻常型银屑病15例,其中男8例,女例;年龄11-68岁,平均年龄岁;均为进行期银屑病。6名正常人皮肤组织,皆取自皮肤外科行重睑术、面部美容切除术者的皮肤,石蜡包埋作为对照组。测定前先将石蜡包埋组织块作常规组织切片及he染色,在光镜下核对诊断,证实其病理诊断无误方采用。 :鼠抗人bcl-2单克隆抗体购自dako公司,生物素化羊抗鼠单克隆抗体系华美生物制品公司产品。兔抗人fas多抗、兔抗人bax多抗及链酶亲和素-生物素-过氧化酶复合物免疫组化试剂盒(简称sabc试剂盒)均购自武汉博士德生物工程公司。 :载玻片用apes处理后干燥备用,切取4-5μm厚的石蜡切片,常规脱蜡水化。bcl-2基因的检测参照abc法稍加改进,阳性对照为正常淋巴结,阴性对照为不加一抗。fas、bax基因的检测采用sabc法,阳性对照分别为武汉博士德生物工程公司提供的fas、bax基因阳性对照片,阴性对照为不加一抗。 :显微镜下观察,棕黄色为阳性结果。阳性强度判断标准如下:强阳性(+++)指50%以上细胞阳性染色;中等强度阳性(++)指25%-50%细胞阳性染色;弱阳性(+)指25%以下细胞阳性染色;阴性(-)指细胞均无任何阳性染色。 2结果6例正常人皮肤组织中:bcl-2基因除部分基底细胞呈阳性反应外,余阴性。、fas和bax基因为阴性表达。15例银屑病组织中:bcl-2基因在15例表皮增生的角质形成细胞中均呈阴性表达,但14例部分基底细胞和浸润的淋巴细胞呈阳性染色;fas基因在12例银屑病组织中呈阳性表达;bax基因在13例中呈阳性,阳性染色遍布表皮各层角质形成细胞中及真皮浅层浸润的淋巴细胞上。在缺少一抗的对照反应中结果均为阴性,而作为阳性对照的正常淋巴结及fas、bax基因阳性对照片则呈广泛强阳性染色。 3讨论bcl-2基因最早是1984年tsujimoto等从滤泡性淋巴瘤中分离出来的一种癌基因,位于18q21位点的b