6肾切除大鼠肾小球结缔组织生长因子表达的影响.doc

中药降氮汤对5/6肾切除大鼠肾小球结缔组织生长因子表达的影响
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:尹莲芳,胡丽华,窦国祥
[摘要]目的:研究中药降氮汤对5/6肾切除肾小球硬化大鼠肾小球结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其防治肾小球硬化的作用机制。方法:采用5/6肾切除肾小球硬化大鼠模型,设立假手术组、模型组、氯沙坦组和中药降氮汤组。检测各组大鼠术后12周末血清尿素氮、肌酐及胆固醇水平。光镜及电镜观察第12周肾组织病理变化,并应用免疫组化法检测肾小球内CTGF的表达水平。结果:中药降氮汤组和氯沙坦组较模型组血清尿素氮、肌酐、胆固醇水平明显下降(),两治疗组间比较无显著性差异(P>)。肾脏病理学检查显示,两治疗组肾小球增生硬化程度明显减轻。免疫组化显示两治疗组肾小球内CTGF表达较模型组明显减少(),两治疗组比较无显著性差异(P>)。结论:中药降氮汤可显著抑制5/6肾切除肾小球硬化大鼠肾小球CTGF的过度表达,其防治肾小球硬化的作用机制与抑制CTGF的过度表达有关。
[关键词]中药降氮汤;肾小球硬化;结缔组织生长因子;SD大鼠
肾小球硬化是几乎所有肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同通路,及早阻止或逆转肾小球硬化对防治终末期肾衰有重大意义。在肾小球硬化的发病机制中,细胞因子网络始终是人们的研究热点。通过中和或抑制某些细胞因子以阻止促炎症细胞因子网络已成为今后肾脏病治疗的重要方向,近年大量研究显示中药在这一领域有巨大潜力。结缔组织生长因子(CTGF)作为一种新发现的生长因子在转化生长因子
β(TGFβ)的诱导下介导TGFβ发挥促进肾小球硬化的作用,其作用日益受到重视[1]。本研究旨在观察中药降氮汤对5/6肾切除肾小球硬化大鼠肾小球CTGF表达的影响,探讨其防治肾小球硬化的作用机制。
1 材料与方法
动物模型建立及分组雄性SD大鼠40只,体重(200±20)g,测24 h尿蛋白10 mgkg-1(24 h)-1,由南京军区总医院实验动物中心提供。随机分为假手术组、模型组、氯沙坦组和中药降氮汤组4组,每组10只。%戊巴比妥钠30 mgkg-1体重腹腔麻醉后暴露双侧肾脏,不予手术切除。其余3组大鼠在麻醉后行右肾切除术,1周后切除左肾上下极各1/3。术后中药降氮汤组大鼠灌服中药煎剂降氮汤10 gkg-1d-1,氯沙坦组大鼠灌服氯沙坦水溶液20 mgkg-1d-1,模型组与假手术组均灌服等量饮用水。大鼠集体笼养,标准饲料(由本校医学院实验动物中心提供),自由饮水,观察12周后处死。
药物试剂及仪器中药降氮汤由黄芪15 g、党参15 g、茯苓10 g、丹参10 g、六月雪15 g和桂枝10 g等组成,由本院药房提供;氯沙坦为杭州默沙东制药有限公司产品;CTGF羊抗人多克隆抗体为美国RD公司产品,SP试剂盒、胃蛋白酶和AEC显色剂均为福州迈新生物公司产品;Techinc RA-XT ;电镜为本校基础医学院电镜室H600型透射电镜。
血清生化指标检测术后12周采血,全自动生化分析仪测定血清尿素氮、肌酐、胆固醇水平。
肾脏病理学检查肾