p16及CyclinD1在食管癌前病变中的表达及其意义.doc

p16及CyclinD1在食管癌前病变中的表达及其意义
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:段秀方, 芦晓红, 柳芳芸
【摘要】目的为探讨食管癌前病变组织中p16蛋白和细胞周期素蛋白D1(CyclinD1)表达的意义。方法应用S-P免疫组织化学的方法检测20例正常上皮、20例单纯增生、42例异型增生、12例鳞癌组织中p16蛋白和CyclinD1的表达。结果 p16蛋白和CyclinD1在正常上皮、单纯增生、异型增生、%、%、%、%和0、%、%、%。正常上皮(单纯增生)、异型增生与鳞癌之间差异有统计学意义()。结论 p16蛋白与CyclinD1可作为判断食管异型增生上皮生物学行为有价值的指标。
【关键词】食管癌;癌前病变;p16;CyclinD1;免疫组化
食管鳞状上皮不典型增生是癌前期病变,可进展致癌[1]。为寻找食管癌早期诊断新的标志物,作者应用免疫组织化学方法对食管正常上皮、单纯增生、异型增生进行p16蛋白和细胞周期素D1(CyclinD1)的检测,并与食管鳞癌进行比较,旨在探讨p16蛋白和CyclinD1是否可作为临床判断食管上皮异型增生转向癌变有价值的指标。
1 材料与方法
标本来源
选取宁夏煤炭总医院2002年1月-2007年4月92例内镜活检标本,其中单纯性增生20例,食管癌前病变42例,食管鳞癌12例,正常或炎症上皮20例,病灶难以确认者采用复方碘液-美蓝双重染色法[2]取材。
方法
标本均10%中性甲醛液固定,常规石蜡包埋、切片,HE染色及免疫组化染色(S-P法),所用一抗p16、CyclinD1、DAB显色剂及SP试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司,严格按试剂盒推荐的高压修复程序进行,DAB显色,苏木素复染,用不加一抗的组织切片作阴性对照,已知阳性切片作阳性对照。
免疫组化结果判断
p16和CyclinD1阳性物质于细胞核和胞浆,其细胞核和细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性细胞,根据阳性细胞数量及染色强度,分为:(-)无阳性细胞;(+)阳性细胞数≤25%,呈浅黄色;(++)阳性细胞数占25%~50%,呈棕黄色;(+++)阳性细胞数50%,呈棕褐色。
统计学方法
采用SPSS ,χ2检验,。
2 结果
各实验样本组都有不同程度的p16蛋白表达,正常上皮、单纯增生、异型增生、鳞癌阳性率逐次降低,%、%、%、%;正常上皮与单纯增生组之间差异无统计学意义(P =);单纯增生、异型增生、鳞癌三者之间差异有统计学意义()。CyclinD1 在正常上皮内不表达,在单纯增生、异型增生、鳞癌阳性率逐次升高,%、%、%,三者之间差异有非常显著统计学意义()。p16蛋白表达与CyclinD1表达呈现负相关(r=-),见图1、2(见封4)、表1。
异型增生等级与p16和CyclinD1阳性率和表达强度