不同条件下人免疫球蛋白类制品HCV抗体检测结果的比较.doc

不同条件下人免疫球蛋白类制品HCV抗体检测结果的比较
【摘要】目的主要探讨人免疫球蛋白类制品在不同条件下对HCV抗体检测结果的影响。方法使用不同的四个生产厂家的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(ELISA),用两种不同的稀释液将免疫球蛋白的蛋白浓度稀释至1%。比较免疫球蛋白原液在酸性(pH4)条件下和中性条件下对检测结果的影响;人免疫球蛋白和静注人免疫球蛋白(pH4)加入稳定剂后对检测结果的影响;静注人免疫球蛋白在酸性条件(pH4)下和中性条件下对检测结果影响。结果两种不同的稀释液对检测结果进行比较,结果完全一致;在酸性条件下,两种不同的稀释液,有一厂家检测结果OD值在灰区内。结论酸性(pH4)条件下的制品不同厂家的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒检测结果有明显差异,使用不同的稀释液和制品中有无稳定剂对检测结果没有影响。
【关键词】人免疫球蛋白 HCV抗体 ELISA
用酶联免疫吸附(ELISA)方法对原料血浆实施HBsAg、HCV抗体和HIV抗体的筛查有利于保障原料血浆的安全[1]。目前对原料血浆的筛查采用单采血浆站使用一种诊断试剂进行初筛,血液制品生产企业使用不同厂家的另一种诊断试剂进行复查,即便经过了两次严格的逐袋筛查,仍有因隐匿性丙肝感染而导致漏检的。目前公认,采用WHO推荐的低温乙醇法并经病毒灭活处理的人血白蛋白和免疫球蛋白是安全的血液制品[2]。即便如此,为进一步提高血液制品的安全性,今年国家食品药品监督管理局已要求血液制品生产企业积极摸索和建立人免疫球蛋白类制品进行HCV抗体和HIV抗体的检测方法及标准,鉴于此因,笔者选择10个批次的经低pH放孵病毒灭活的人免疫球蛋白,在同一蛋白浓度条件下(蛋白浓度为1%),对不同pH值条件和按制品工艺要求加入不同稳定剂,以及两种不同蛋白稀释液对HCV抗体检测结果的影响进行了比较,现报告如下。
1 材料与方法
样品来源样品取自本所血液制剂室低pH放孵病毒灭活后的10批人免疫球蛋白原液(编号1~10)。
试剂与仪器
试剂丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(ELISA)分别由厂家A,批号:C20061103、C20070101、C20070203;厂家B,批号:20061113、20070107、20070203。厂家C,批号:20060801、20060802;厂家D,批号:2006085806、2006095807、2006115808。
仪器酶标仪,型号:Multiskan Mk3(芬兰雷勃公司生产),洗板机,型号:Wellwash 4 Mk2(芬兰雷勃公司生产),检测按仪器和试剂盒要求操作。
稀释方法(1)样品A 低pH放孵病毒灭活后的免疫球蛋白原液,不含任何稳定剂,~;样品B:低pH放孵病毒灭活后的免疫球蛋白原液,按生产工艺要求配制为肌肉注射人免疫球蛋白,含氯化钠、甘氨酸、麦芽糖、硫柳汞,作为稳定剂,~;样品C:低pH放孵病毒灭活后的免疫球蛋白原液,按生产工艺要求配制为静注人免疫球蛋白,含麦芽糖作为稳定剂,~。分别使用生理盐水和相应的诊断试剂盒的稀释液将以上三类样品的蛋白浓度稀释为1%,pH值不做调整,为原制品pH值,所得样品编号为
ⅠA1、ⅠA2; ⅡB1、ⅡB2; ⅠC1、ⅠC2,