2在鼻咽癌顺铂耐药中的作用.pdf

诒茄拾┧巢鸵┲械淖饔博士研究生:谢思明姚开泰教授指导教师:摘要显而容易被忽略,因此确诊的患者有%以上都是中、晚期,常伴有转移。对这耐药性的产生,往往容易导致患者复发,因此对化疗药物耐药性的研究具有重研究表明,在化疗中,含铂类方案的治疗效果要优于非铂类方案,而基因,根据跨膜区域的不同可分为、、、吒鲅亲澹渲谐博士学位论文研究背景和目的鼻咽癌琋且恢种饕7⑸谖夜戏降区的鼻咽部的恶性上皮性肿瘤。由于⑸牟课槐冉弦危缙谥⒆闯2幻类患者除了采用常规的放疗外,化疗也是必不可少的一种治疗方法。但是由于要的临床意义。在铂类方案中最常用的是顺铂。目前认为肿瘤细胞对顺铂产生耐药性的机制非常复杂,比较引人关注的就是耐药细胞如何能够阻断顺铂与慕岷希中能把毒性药物泵出细胞外而使药物蓄积减少的转运蛋白家族就成为了研究的热点。T说鞍椎淖饔没浦饕J峭ü淇缒で蛴氲孜锝岷希ü芰慷训孜锉贸鱿赴狻D壳***⑾值腁转运蛋白家族共有个见的与耐药相关的基因有十个:、也称为冲、、。有报道发现坏ǹ稍谙赴け泶铮部在细胞核膜表达;有研究表明当泶锝档偷氖焙蛳赴运巢拿舾行栽,
加,而泶镌黾拥氖焙蛳赴运巢哪鸵┬栽黾印D壳霸贜中尚未见胨巢涔叵档奶教郑虼吮究翁饽庖訬为研究对象,探讨胨巢鸵┑墓叵担狽的临床化疗提供参考。恿俅彩占弑噶俅苍ず笞柿系牟±荻运巢频那榭龇治C舾凶楹一年左右,用ḿ觳庀赴脑鲋衬芰Γ魇较赴跫觳庀赴芷诘谋浠抑制率,并计算出以及耐药指数;荧光定量ḿ觳馐殖<挠肽药相关的T说鞍自谟盏记昂髆谋浠庖呦赴Хḿ觳鞍字实谋泶锴榭觯桓咝б合嗌追ḿ觳釶饔们昂竽鸵┫赴出稳定的干扰株,用荧光定量ḿ觳釧在干扰前后的变化:法和免疫细胞化学法检测干扰前后鞍妆泶锏那榭觯挥ḿ觳庀赴脑鲋衬芰Γ涣魇较赴跫觳庀赴芷诘谋浠籑法检测干扰前后顺铂对细胞的抑制情况并计算出:高效液相色谱法检测干扰前后细胞内顺铂蓄积的变化情况。最后通过裸鼠皮下移植瘤实验来探讨干扰克隆中文摘要方法不敏感组,通过免疫组化法检测谋泶锼剑缓蠖越峁邪定量积分法分析。统计分析谋泶镉胄员稹⒛炅洹⒅琢龇制凇⒒菩果及预后的关系。同时根据化疗的方案分为..,并与的表达情况进行统计分析。訡赴盟巢ザ烙盏家约坝盟巢遴奏ち:辖杏盏迹盏ḿ觳舛嘁┠鸵┠孀<罰饔们昂笏巢阅鸵┫赴懊舾邢赴内顺铂蓄积的变化情况。靡压菇ǖ腁慢病毒干扰载体,对细胞进行扇牛秆在体内对拿舾行浴‘
彩占齆标本。免疫组化结果表明,泶镏饕6ㄎ辉瓯局谢泼舾凶槲渲蠥高表达的占%;谋泶锴榭鼋蟹治觯峁砻鰽的表达与、瓯局杏凶R频奈渲蠥高表达的有例;中化疗效果与泶锏墓叵到刑教郑峁⑾衷谧R谱橹校个月疍联合诱导个月疍螅琈法检测作用前后匀细胞的抑制情况,计算出,结果表明与相比,//运巢幽鸵⒛鼙籔糠帜孀!Mü冉螴诱导耐药的/运巢哪鸵┬,逆转后降为博士学位论文结果⒈茄拾┳橹蠥表达及临床意义细胞膜和细胞浆,少数可见表达于细胞核。经统计分析,谋泶与患者的年龄、性别、,其中弑泶锏恼/阶锳的表达有显著性差异.,,不敏感组中谋泶镆高于敏感组,提示谋泶镉牖菩Ч泄亍=徊蕉曰品桨赣攘:,其中弑泶锏挠例,两组表达有显著性差异.,,转移组中谋泶镆8哂未转移组,提示谋泶镉胱R朴泄亍=徊蕉宰R谱楹臀醋R谱不敏感组中谋泶锵灾哂诨泼舾凶琍.⒛鸵┫赴甑募ḿ癆表达的检测用盏糃/运巢哪鸵┬,逆转后降为叮欢:丁
⑶以诟高效液相色谱法检测逆转前后细胞内顺铂蓄积变化的情况,结果表明逆转前谀鸵┫赴械男罨跎伲巢谙赴诘男罨直鸺细胞的蓄积有所增加,谙赴诘男罨贑疍细胞中降为表达下调对细胞生物学特性的影响单克隆并扩大培养,筛选鲈潞螅糜ü舛縋技术检测各克隆的泶锴榭觯秆〕%%:免疫细胞化学法结果表明贑下调。两株干扰克隆分别命名为/—法检测细胞增殖情况,与阴性对照和细胞相比,—ḿ觳馊橄赴惺殖<挠肽鸵┯泄氐腁转运蛋白的表达情况,。耐药的/赴蟹⑾諥还可在细胞核中表达。少了/和/;逆转后顺铂在叮贑疍细胞中降为丁靡压菇ê玫穆《靖扇旁靥澹奥《竞螅煤懈扇旁靥宓穆病毒感染细胞,杀稻瘟菌素筛选抗性克隆,约天后,挑取抗性为下一步实验的研究对象。法表明两株干扰克隆和阴性对照中的表达强度较一致,而两个干扰克隆中谋泶锩飨/.,阴性对照为/。
以舾行宰罡叩腸/.作裸鼠皮下移植瘤实验,隆中细胞的增殖速度没有统