选修3复习基因工程课件.ppt

§基因工程的主要考点:基因工程基本操作的四个步骤1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定一、目的基因的获取获取目的基因的常用方法:(1)从基因文库中获取(3种构建方法:鸟枪法,逆转录法,氨基酸序列合成法)(2)利用PCR技术扩增(3)人工合成①概念:PCR全称为_______________,是一项在生物____复制___________的核酸合成技术③条件:_______________________、_______________、___________(做启动子)、___________.②原理:__________④方式:以_____方式扩增,即____(n为扩增循环的次数)⑤过程:变退延重957聚合酶链式反应体外特定DN***段DNA复制已知基因的核苷酸序列四种脱氧核苷酸一对引物DNA聚合酶指数2n※利用PCR技术扩增目的基因过程:a、DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,_____断裂,形成___________b、退火(复性55℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部________。c、延伸(70℃-75℃):在Taq酶的作用下,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的________。D、重复氢键单链DNA双链DNA链二、基因表达载体的组成:“复启目终标”复制原点+启动子+目的基因+终止子+标记基因(三)将目的基因导入受体细胞转化——方法将目的基因导入植物细胞将目的基因导入动物细胞将目的基因导入微生物细胞农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法——显微注射法——感受态细胞目的基因进入_________内,并且在受体细胞内维持_____和_____的过程受体细胞稳定表达(四)目的基因的检测与鉴定——“三杂交法+个体生物科学水平鉴定“检测—鉴定——①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因②检测目的基因是否转录出了mRNA③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等方法——方法——方法——DNA分子杂交分子杂交(注意与上不同之处)抗原抗体杂交§细胞工程的主要考点1、细胞工程的操作水平2、动植物细胞工程的技术手段3、体现全能性的终点4、组织培养的常用材料5、植物培养基加入的“两素”及“生多根多”6、培养基的“2源1盐1水”7、去壁方法8、促融方法——“聚离电振+灭活病毒”