糖尿病大鼠心肌钠钙交换蛋白与肌浆网钙泵mRNA的表达.pdf.pdf

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山东医药年第卷第期
· 基础研究·
糖尿病大鼠心肌钠钙交换蛋白与肌浆网
钙泵的表达
王崴。金万宝,魏敏杰。杜娃,金铎
中国医科大学药学院,辽宁沈阳;辽宁电力中心医院
【摘要大鼠腹腔注射链佐霉素制备实验性糖尿病大鼠模型。将大鼠成模后分别于、和周时取心肌组
织,进行病理学检查及计算心脏相对重量;应用—方法扩增钠钙交换蛋白亚型。及肌浆网钙泵亚
型两种产物,计算其相对数量的变化。发现糖尿病各组心脏湿重与体质量的比值均明显高于对
照组,病理检查显示心肌细胞呈不同程度变性坏死。周时,糖尿病组。和:相对含量比对照组
明显减少.。提示在糖尿病大鼠心脏功能的减退与。和:的水平降低有一定关系。
关键词钠钙交换蛋白;肌浆网;钙泵;心肌疾病;糖尿病
中图分类号. 文献标识码文章编号..
心肌细胞内钙稳态的维持是依靠细胞膜和细胞腔注射麻醉后,迅速处死,取心脏,用冷生理盐水冲
内多个转运系统的共同调节来完成的,如细胞膜上洗干净,清洁滤纸吸干水分后称心脏湿重。剪取左
的钠钙交换蛋白、钙通道、钙泵以及肌浆网心室肌标本—块,每块—左右,分别
上的钙泵等。年月一年月, 用锡纸包裹,液氮速冻,置于一℃保存备用。将
我们研究了链佐霉素所致糖尿病大鼠心肌病理检查用标本置于一℃冰冻,截面切片,染
亚型及亚型的色后,光镜观察心肌结构。
水平变化,旨在探讨其与糖尿病大鼠心肌病.. —按常规方法制备左心室标本总
变的关系。,用紫外分光光度计测定样本的浓度与纯
材料与方法度。取总加入按试剂盒说明书配置的反
. 实验动物与药物大鼠,雄性,—转录液中至终体积。反应条件:℃
,由中国医科大学实验动物中心提供。购,℃,,个循环,逆转录产物
于公司;购于公司;购于℃保存。,的是将产物加入
公司;.试剂盒购于大连宝生物按试剂盒说明书配置的的反应体系中。
工程有限公司;其他引物、分子量标记物等购于上海引物:上游.,’℃.,下
生工生物工程有限公司。在使用时溶于柠檬酸游一.,预期片
。断大小;做内对照。反应条件:℃
. 实验方法,个循环;℃,℃,℃,
.. 糖尿病大鼠模型的制备将大鼠随机分为个循环;℃,个循环;产物保
糖尿病组和正常对照组。糖尿病组大鼠腹腔注射存。的是将产物加入按
/的,对照组注射同等容积的柠檬酸溶试剂盒说明书配置的的反应体系中。引
液。给药周后,大鼠尾静脉取血测血糖,糖尿病组物:。上游.
血糖高于./用于实验研究。将实验组和对.,下游,’℃.
照组大鼠分别随机分为周、周和周组。每周一,预期片断大小;.做内参照。
观测体质量和空腹血糖,大鼠饲养至相应的周数处反应条件:℃,个循环;,
,
死取材。, 个循环;,个循环;
.. 病理学检查将大鼠用%戊巴比妥钠腹产物℃保存。取扩增产物,%琼脂糖
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山东医药年第卷第期
凝胶电泳,利用凝胶成像系统成像。计算—肌细胞的和蛋白水平升高,
与的比值及与和蛋白水平降低,水平升高是对.
—的比值。水平下降的一种代偿机制,这就是通常所说的
. 统计学方法所得数据采用±表示,组间与平衡假说。随着心肌病变的逐渐严
比较采用检验,以≤.为有统计学差异。重,的代偿能力