医学课件-HPLC法测定穿心莲片中穿心莲内酯的含量-PPT课件.ppt

HPLCHPLC法测定穿心莲片中法测定穿心莲片中穿心莲内酯的含量穿心莲内酯的含量一、实验目的一、实验目的二、二、仪器与试药仪器与试药三、三、色谱条件色谱条件四、四、实验步骤实验步骤五、注意事项五、注意事项六、数据处理六、数据处理七、七、思考题思考题[实验目的]1. 掌握HPLC法定量分析原理及实验方法。2. 熟悉HPLC仪基本操作及其在中药制剂分析中应用。[仪器与试药]美国Agilent1100 高效液相色谱仪、紫外检测器、手动进样器、自动进样器上海必能信SB3200超声提取器穿心莲内酯对照品穿心莲片[色谱条件]ODS柱(250×,5um),以甲醇-水(60:40)为流动相,检测波长为225nm,流速1ml/min。??流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;范围;??水相流动相需经常更换(一般不超过水相流动相需经常更换(一般不超过22天),防止长菌变天),防止长菌变质;质;??使用双泵时,使用双泵时,AA、、BB、、CC、、DD四相中,若所用流动相中有含盐流四相中,若所用流动相中有含盐流动相,则动相,则AA、、DD((进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,BB、、CC((进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相;进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相;注意事项注意事项[实验步骤] :取穿心莲内酯对照品适量,精密称定,。,除去包衣,精密称定,研细,,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,,置样品瓶中,备用。,注入液相色谱仪,测定。[数据处理及计算]外标一点法计算(mg/片)[思考题],不是取1片提取测定???