P2X7受体在Caski细胞膜上的表达及功能检测.pdf

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【参考文献】——.,
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:—. 牟颖,
,.: .高等学校化学学报,,:—.
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.,,:—. .现代泌尿外科杂志,,:—.
,,,. 编校:张志明
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受体在细胞膜上的表达及功能检测
孙丽,韩莉,刘朝奇,石慧,赵琳,神谢静,谭超

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【摘要】目的:用重组质粒/—一建立细胞膜稳定表达受体的人宫颈癌细胞
株。方法:采用脂质体转染法将重组质粒/—一转染入细胞后,应用—、
及细胞免疫荧光法筛选高表达的细胞株;法检测细胞增殖;的天然配
【收稿日期】——
【修回日期】———
【基金项目】湖北省自然科学基金资助项目编号:
【作者单位】三峡大学医学院,湖北宜昌
三峡大学医学院免疫学重点学科,湖北宜昌
三峡大学分子生物研究所,湖北宜昌
【作者简介】孙丽一,女,山东菏泽人,硕士研究生,主要从事细胞与分子免疫的研究。—:.
【通讯作者】韩莉一,女,湖北宜昌人,教授,硕士生导师,主要从事微生物与免疫学的研究。—:..
现代肿瘤医学年月第卷第期,.,.,. ··
体处理高表达细胞后,检测细胞生存率,检测细胞凋亡率。结果:成功获得高表达受体
的细胞株;与对照细胞相比,高表达受体可抑制细胞生长;不同浓度作用细胞株后可
抑制细胞增殖,并导致细胞凋亡率增加。结论:高表达可抑制细胞生长,并且在其配体作用
下诱导细胞凋亡。
【关键词】受体;宫颈癌;;细胞凋亡
【中图分类号】—;. 【文献标识码】:./..—...
【文章编号】—一——
受体是受体家族的一员,是门控的离子.. 高表达受体的细胞株的建立人宫颈
通道受体。在的刺激下,受体形成一个快速、双向癌细胞在转染前天传代至细胞融合大于% ,转染
的阳离子通道,从而介导细胞对、的通透及大量前换为无血清无双抗的培养液孵育。应用
内流;受体持续活化可形成较大的非选择性膜孔,允许试剂法将纯化的重组质粒/一
细胞膜对大分子物质最大可达的非选择性通透⋯。—转染至宫颈癌细胞,同时转染空载质粒作
宫颈癌是恶性程度较高的肿瘤,发病率居妇科肿瘤第二位。为对照。、%培养箱孵育后更换为
研究发现受体在宫颈癌细胞上表达水平比正常上皮细完全培养液培养,培养后在培养液中加入
胞上降低,并且受体可以通过线粒体途径介导人子宫/进行筛选,—天更换一次培养液,待细胞克隆形
颈癌细胞凋亡;另外宫颈癌细胞中剪接体一与全长成后,挑取转染细胞进行放大培养。
受体共同表达导致了细胞凋亡的缺陷,使宫颈癌细胞.. —法筛选高表达的细胞株
迅速增长。因此本实验通过建立稳定高表达受体分别收集转染重组质粒/一—及空载质