脉冲电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响(1)..doc

脉冲电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响(1)    【摘要】 目的:探讨脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs):用全骨髓贴壁法分离rMSCs,对其进行1Hz和15Hz的PEMFs刺激,MTT法测定细胞增殖水平,检测碱性磷酸酶活性,:rMSCs经PEMFs刺激后,各实验组细胞增殖水平均有不同程度提高,差异具有统计学意义(P<),其中1Hz,(3d,±;5d,±),对照组(3d,±;5d,±),差异具有统计学意义(P<);碱性磷酸酶检测实验组水平升高(5d,±;15d,±),对照组(5d,±;15d,±),差异具有统计学意义(P<),:rMSCs经PEMFs刺激后,能促进体外培养rMSCs的增殖水平及成骨分化,磁场参数对实验结果有影响.【关键词】 脉冲电磁场;骨髓间充质干细胞;增殖;成骨细胞 0引言骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)存在于骨髓基质系统中,具有自我更新能力和多向分化潜能,免疫原性弱[1-3].脉冲电磁场(icfields,PEMFs)能够促进活细胞增殖及分化,刺激骨局部因子的产生,改善骨密度和生物力学特性[4],用于骨折延迟愈合、骨不连、骨质疏松症等骨科疾病[5].近年来,国内学者在这方面开始了大量研究工作,认为MSCs经12Hz,,细胞增殖加速,符合成骨细胞的形态特征和生物学特性[6].利用恒磁场作用于骨组织中细胞,发现恒磁场处理可以促进MSCs向成骨方向分化[7].本实验通过观察rMSCs在低频率PEMFs的作用下增殖水平变化和细胞分化情况,以了解不同参数的PEMFs对rMSCs产生的影响. 1材料和方法 SD仔鼠,12~15d,体质量30~35g,(第四军医大学生物医学工程系研制,),(美国Hyclone公司);胎牛血清(天津灏洋生物制品科技有限责任公司);胰蛋白酶,茜素红S(美国Sigma公司);盐酸四环素胶囊(西安利君制药股份有限公司);碱性磷酸酶试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司). ,~2mm3的小块,100目筛网过滤后移入离心管中,1200rpm离心5min,弃上清,. 过碘酸雪夫氏染色、油红O染色和碱性磷酸酶(ALP)染色. ×106cells/孔接种在24孔板上,第4日开始,每日消化3个孔,分别计数,×104cells/孔接种在24孔板上,第2日开始以同上方法绘制生长曲线. PEMFs发生仪频率:15Hz,1Hz;