CoV5’-UTR相应cDNA作启动子时转录起始位点研究.doc

CoV5’-UTR相应cDNA作启动子时转录起始位点研究CoV5’-UTR相应cDNA作启动子时转录起始位点研究重庆医科大学2005年第30卷第6期()一849一文章编号:0253—3626(2005)06—0849—03SARS—CoV5'一UTR相应eDNA作启动子时转录起始位点研究张建军一,黄爱龙,史小玲,张晓锋(,重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆400016;,泸州646000)【摘要】目的:分析具有启动子功能的SARS—CoV基因组5'一UTRcDNA在转录出mRNA时,转录起始的位点,—CoV5'一UTR驱动下报告基因的真核表达质粒pGL3—5'一UTR,转染HepG2细胞,然后提取总RNA,采用5'一RACE,扩增出相应序列,通过比照,,得到一个约440bp的产物,经A—T克隆后测序,转录体起始位点在SARS—CoV5'一UTR的第56位核苷酸,其下游是保守的保守的转录调控序列(TRS).结论SARS—CoV5'一UTR在调控基因转录时,第56位核苷酸及其下游的TRS具有重要作用.【关键词】SARS—CoV,5'一非编码区,启动子,起始位点【中国图书分类法分类号】R695【文献标识码】A【收稿日期】2005—05—8LocalizationoftheinitiationsiteofthetranscriptiondrivenbythecDNACOrreSpOndingtoSARS—CoV5'一UTRZhangJianjun,etal(InstituteforViralHepatitis,ChongqingMedicalUniversity)【Abstract]ObjectivesTolocalizetheinitiationsiteofthetranscriptdrivenbythecDNAcorrespondingtoSARS—CoV5'—5'—CoV5'一UTR,wastransfectedintoHepG2cells,,theextractedtotalRNAWasreverse—transcribedusingaspecificprimerandsubjectedtotwoturnsofsemi———transcriptionandtwoturnsofsemi—nestedPCR,andthe56thnucleotideofSARS—CoV5'一UTRwasfoundbeingthein