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红茶和绿茶多酚与猪胰腺α福建医科大学硕士学位论文红茶和绿茶多酚与猪胰腺α-淀粉酶相互作用的酶催化动力学和荧光猝灭研究姓名:王文君申请学位级别:硕士专业:口腔临床医学指导教师:姚江武20090301红茶和绿茶多酚与猪胰腺,【(淀粉酶相互作用的酶催化动力学和荧光猝灭研究中文摘要目的:本研究旨在以猪胰腺,(淀粉酶(,,,;,,,,,,;,,,,,;,(,,,,,,,,,,,)作为人唾液,【(淀粉酶(,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,)的蛋白质模型,通过酶的动力学和荧光猝灭实验,从分子水平考察红,绿茶茶多酚(,,,,,,,,,,,,,,,,,)抑,,,,,,催化水解淀粉的效果和特异性,以及对,,,蛋白质内源性荧光的猝灭效果,从而为解释红,绿茶,,对口腔感觉的收敛性作用和酶抑制类型的生理意义奠定理论基础。方法:在不间断,,,,,波长下,测量,,,催化生成的麦芽糖的吸光度增加值,通过动力曲线的直线段的斜率获得反应速度,,由,,,,,,,,,,,,,,,图求出动力学参数(‰。和墨),统计学分析确定抑制类型。滴加不同浓度的红,绿茶,,溶液,以,,,,,波长(,)检涣(,,,,的荧光强度,通过获得的荧光光谱计算,,,,(,,,,,,猝灭常数(凰,)、双分子猝灭常数(缸)、表观静态猝灭常数(‰)、动态猝灭常数(杨)和静态猝灭常数(,,)。结果:无抑制剂和红茶抑制剂的最大反应速度(‰戤)之间的差异具有统计学意义(,,,(,,),无抑制剂和绿茶抑制剂的酶一底物解离常数(,)之间的差异具有统计学意义(尸,,(,,)。红茶抑制剂解离常数(,)值高于绿茶(,,,(,,)。同一品牌,,的动、静态猝灭常数(,,与,,)之问的差异具有统计学意义(,,,(,,);双分子猝灭常数(岛)大于双分子扩散限制性猝灭常数值(,,,,‘,,‘,,,),伴随红,绿茶,,溶液浓度增加,荧光发射波长(,嘲)发生红移。红,绿茶多酚与,,,在,,,,,上存在一个结合位点(刀,,)。红,绿茶猝灭剂对,,,荧光猝灭的距离作用的踌在统计学意义(尸,,(,,),红茶的表观猝灭常数大于绿茶(,,,。,,)。结论:红茶,,对,,,的抑制为非竞争性抑制型,绿茶,,对,,,的抑制为竞争性抑制型。红茶抑制剂既能与自由酶的活化中心位点结合,也能与酶(底物上的位点结合,而绿茶抑制剂仅能与活化中心位点结合。红,绿茶对,,,的荧光猝灭同时存在三种机制,除了动态和静态猝灭外,还存在距离作用。猝灭反应是以形成基态复合物为主的静态猝灭,且红,绿茶,,猝灭效果相同。红,绿茶,,对,,,的荧光猝灭反应引起了,,,的分子构象发生改变。关键词:红茶绿茶猪胰腺小淀粉酶抑制剂荧光猝灭,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,;,,,,儋,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,;,,,,,;,—,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,;,,;,?,,,;,,,,,,,,,,,;,〕,,,,;,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,;,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,;,,,,,;,—,,,,,,,(,,,),,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,;,,;,?,,,;,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,;,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,;,?,,,;,,,(,,,,,,,:,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;;,,,,,(,,,,,,;,,,,,,,,,,(