小鼠(mouse)弹性蛋白酶(elastase)-活性ELISA试剂盒说明书 图文.doc

小鼠(mouse)弹性蛋白酶(elastase)-活性ELISA试剂盒说明书_图文上海笃玛生物科技有限公司本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断小鼠(Mouse)弹性蛋白酶(Elastase)ELISA检测试剂盒使用说明书试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被弹性蛋白酶(Elastase)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的弹性蛋白酶(Elastase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品活性。样品收集、:使用不含热原和内***的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。(450nm):-10uL、2-20uL、20-200uL、200-℃-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。,密封(低温干燥)保存。;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。、加液量及顺序进行温育操作。。上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×**6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、、15、30、60、120U/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。,剩余板条用自封袋密封放回4℃。,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。、B各50μL,37℃避光孵育15min。