染色体制片方法.doc

|首页|课程申报书|教学大纲|授课教案|参考书目|网络课程****题|教学录像|发表论文|资源库|(六)植物细胞有丝分裂一、实验目的(1)学****和掌握植物根尖细胞压片技术。(2)观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。二、实验原理有丝分裂是植物细胞增殖的主要方式,在有丝分裂过程中,细胞核内的染色体能准确地复制,并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去,使子细胞遗传组成与母细胞完全一样。从而可推断生物性状的遗传与染色体的准确复制和均等分配有关,支配生物性状的遗传物质主要存在于细胞核内的染色体上。高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织,根尖取材容易,操作和鉴定方便。通过对根尖的固定、染色和压片,可在显微镜下观察到大量处于有丝分裂各个时期的细胞和染色体,看到染色体的变化特点和染色体的形态特征,进行染色体计数。为了获得更多的中期染色体图像,可以采用药物处理或冷冻处理的方法,阻止纺锤体的形成,使细胞分裂停止在中期,同时还可以使染色体缩短,易于分散,便于观察研究。另外,通过对细胞组织进行酸性水解或酸处理除去细胞之间的果胶层,并使细胞软化,便于细胞彼此分开,有利于压片和染色。三、实验材料小麦(TriticumSpp.)、玉米(Zeamays)、大蒜(Aillumsativum)、洋葱(Aillumcepa)、蚕豆(Viciafaba)等。四、,恒温箱,显微镜,水浴锅、分析天平、扭力天平、电炉、温度计、剪刀、镊子、刀片、量筒、量杯、三角瓶、烧杯、漏斗、培养皿、酒精灯、滴瓶、载玻片、盖玻片、滤纸、标签、胶水等。、95%酒精、70%酒精、45%酒精、%醋酸洋红、%苏木精液、4%铁明矾液、苯酚,亚硫酸、二甲苯、秋水仙素、对二***苯、8-羟基喹啉、α-溴萘、lmol/L盐酸、25%%果胶酶混合液、加拿大树胶等。五、(1)大蒜和洋葱根尖:将大蒜或洋葱置于盛清水的小烧杯口上,使根茎部与水接触,然后转移到25-28℃,在上午9-10时剪去根尖约lcm备用。(2)玉米或小麦,蚕豆根尖:用温水将蚕豆种子浸种2天,玉米及小麦种子浸种1天,侍吸水膨胀后转移到铺有几层吸水纸的培养皿或塘磁盘中,上面盖双层湿纱布并加入少许水,放在25-28℃-5时取下根尖备用。,在固定之前应对剪下的根尖进行预处理,这样可以改变细胞质的粘度,。预处理的方法有低温预处理和药物预处理。(1)低温预处理:将剪取的根尖浸入盛有蒸馏水的烧杯内,置于4℃的冰箱中进行低温处理24小时。此法效果很好。对染色体无破坏作用,,各种作物都适用。(2)药物预处理:常用药物有秋水仙素溶液、对二***苯溶液、8—羟基喹啉等。,迅速渗入组织和细胞将之杀死,使其形态结构和内含物尽可能保持生活时的完整和真实状态。固定时,将预处理过的根尖用蒸馏水冲洗两次(约5分钟)。然后移入卡诺氏固定液中,在4—15℃条件下固定20一24小时后用70%酒精冲洗2次转入70%℃冰箱内保存,保存时间最