提高白色链霉菌盐霉素产量工艺探究.doc

提高白色链霉菌盐霉素产量工艺探究.doc提高白色链霉菌盐霉素产量工艺探究【摘要】;以白色链霉菌SL?F2?110为产生菌,着重从菌种选育和补料工艺两方面研究提高白色链霉菌的盐霉素产量。结果表明,①***化锂前处理与紫外线复合处理后筛选出的突变株盐霉素发酵产量有很大提高;②在基础培养基中减少豆油加量,采用中间补豆油控制,发酵水平与没有补料的相比有较大提高。毕业论文【关键词】;盐霉素;白色链霉菌;发酵工艺毕业论文Studyontheimprovementoffermentationprocessforyieldofsalinomycin毕业论文;ABSTRACT;?F2?110astheproducingstrain,(salinomycin)是从白色链霉菌(Streptomycesalbus)的深层培养液中分离得到的一种聚瞇类抗生素,由6分子乙酸,6分子丙酸和3分子丁酸提供的相应酰基缩合而成[1〜2]。日本于1979年批准盐霉素用作球虫病防治剂,1987年欧共体批准盐霉素用作抗球虫剂和促生长剂,1993年我国农业部正式批准其作同样的用途。盐霉素作为禽用抗球虫剂在世界范围内得到普及,应用前景将十分广泛。抗生素发酵水平的提高,主要取决于菌种改良和培养工艺优化[3]o为提高白色链霉菌中盐霉素产量,在过去工作的基础上[4〜7],我们从菌种选育和补料工艺两方面进行研究,以期提高盐霉素的生产水平。毕业论文1;材料与方法毕业论文1;菌种供试菌株为白色链霉菌(Streptomycesalbus)SL?F2?;培养基;斜面培养基;高氏一号培养基。摇瓶培养基(g/L);牛肉膏5,酵母粉3,***化钾2,丙三醇20,消泡剂1。种子培养基(g/L);葡萄糖15,黄豆粉20,小麦胚芽10,碳酸钙3,牛肉膏5,酵母粉3,***化钾2,丙三醇20,KH2P041,消泡剂1。〜。■发酵培养基1(不补料工艺)(g/L);硫酸铁5,黄豆粉30,豆油85,,KH2P041,,碳酸钙5,食盐3,消沫剂1。〜。■发酵培养基2(补豆油工艺)(g/L);硫酸铁5,黄豆粉30,豆油50,KH2P041,,碳酸钙5,食盐3,消沫剂1。〜。效价测定培养基(%);,,,。〜。;实验规模■摇瓶种子;250ml三角瓶内装25ml培养基,接入成熟斜面胞子,331于摇床培养70h左右,转速220r/mino种子培养;20L种子罐装12L培养基,接入摇瓶种子,接种量120ml,罐温35°C,,搅拌转速500r/min,通气比为1:,培养30h左右。发酵培养;50L发酵罐装培养基30L,从种子罐取种3L接入,罐温33°C,,搅拌转速400r/min,通气比为1:,中途采用补加豆油工艺与不补料工艺两种方式,12d放罐,测定放罐液效价。毕业论文1・4;测定方法还原糖测定;斐林试剂法。氨基氮测定;甲醛法。■盐霉素效价测定;以杯碟法测定,检定菌为短小芽胞杆菌。豆油和脂肪酸的测定;按文献[8]进行。■脂肪酶活力的测定;37£下,将lml发酵液每分钟分解底物产生1nmol脂肪酸定义为一个酶活单位。菌丝浓度的测定;10ml发酵液于离心管内3000r/min离心lOmin,测量上清液体积,计算得出:菌丝浓度(%)=(10-上清液体积)210X100%;诱变方法悬浮液制备;将生产用SL?F2?110砲子斜面,加蒸馆水10ml,制成胞子悬液,倒入盛有玻璃珠的三角瓶中,置旋转摇床振荡15min,然后用滤纸过滤,使成单胞子悬液,供诱变处理用。***化锂处理;%.%、%三种浓度进行处理。***化锂与培养基按上述比例混合后置平皿培养3〜5d,观察敏感度,10d观察菌落形态,过筛后进行摇瓶发酵试验,比较突变株与对照株的效价。***化锂与紫外线复合处理***化锂前处理;%***化锂的单胞子悬浮液,28°C振荡4h,取5