靶向ABCG2的RNA干扰逆转乳腺癌球囊细胞化疗耐药的研究.doc


靶向 ABCG2 的 RNA 干扰逆转乳腺癌球囊
细胞化疗耐药的研究#
杨星,胡倩,丁林潇潇,林潇,蒋君霞,姚和瑞**
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(中山大学孙逸仙纪念医院肿瘤科, 广州, 510120)
摘要:目的:通过靶向 ABCG2 的 RNA 干扰逆转乳腺癌球囊细胞化疗耐药。方法:以 ABCG2
为靶点,设计 ABCG2-siRNA,构建 ABCG2 干扰慢病毒载体并包装好病毒,稳定转染到筛
选好的 MCF-7 球囊细胞中,Western Blot 方法检测 ABCG2 的表达情况,MTT 法检测 RNAi
沉默 ABCG2 基因对球囊细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测 RNAi 沉默 ABCG2 对 MCF-7
球囊细胞在耐药情况下的细胞周期变化和凋亡状况。结果:ABCG2 干扰慢病毒载体成功构
建并包装病毒,建立起 ABCG2 稳定沉默的 MCF-7 乳腺癌球囊细胞系,Western Blot 结果显
示 ABCG2 在球囊细胞中高表达,RNAi 沉默后 ABCG2 表达下降,MTT 结果显示,在 5-Fu
的作用下的 MCF-7 贴壁细胞抑制率高于 MCF-7 球囊细胞,而沉默 ABCG2 的 MCF-7 球囊
细胞其抑制率会随着 5-Fu 量的增加而增高,流式细胞仪结果显示球囊细胞大多处于 G0/G1
期,加入 5-Fu 和沉默 ABCG2 后,处于 G0/G1 期细胞数会增加,凋亡率会明显增加。结
论:乳腺癌球囊细胞高表达 ABCG2 蛋白,其 5-Fu 耐药性高于亲本 MCF-7 细胞,沉默 ABCG2
增加球囊细胞在 5-Fu 的作用下的细胞抑制率及凋亡率,从而逆转对 5-Fu 的耐药。
关键词:肿瘤学;乳腺癌;球囊细胞;ABCG2;RNA 干扰;药物耐受
中图分类号:
RNA Interference Targeting ABCG2 Reverses
Chemotherapy Resistance in Mamosphere Cell of Breast
Cancer
YANG Xing, HU Qian, DINGLIN Xiaoxiao, LIN Xiao, JIANG Junxia, YAO Herui
(Department of oncology, Sun Yat-Sen Memorial Hospital of Sun Yat-Sen University, Guangzhou,
510120)
Abstract: Objective
To investigate the effect of RNA interference targeting ABCG2 gene to
reverse chemotherapy resistance of mamosphere cell of breast cancer. Methods ABCG2-siRNA
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sequence was designed and inserted into lentiviral vector. Then we packaged virus and established
a stable ABCG2-silenced MCF-7 m