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硕士学位论文


论文题目髓系白血病的分子遗传学研究
研究生姓名尹佳
指导教师姓名孙爱宁陈苏宁
专业名称内科学(血液病学)
研究方向白血病的基础与临床
论文提交日期 2013 年 5 月
髓系白血病的分子遗传学研究中文摘要
髓系白血病的分子遗传学研究
中文摘要
本论文包括二部分:(一)急性早幼粒细胞白血病的分子遗传学研究;(二)两例
非典型慢性髓细胞白血病的临床及实验室特征研究。
第一部分急性早幼粒细胞白血病的分子遗传学研究
目的:分析急性早幼粒细胞白血病(APL)中多种常见白血病基因的突变情况,
初步探讨这些基因突变是否协同参与急性早幼粒细胞白血病的发病机制及其与 APL
病人的临床表现、细胞遗传学和分子危险度分层的关系。
方法:病例来源于 2005-2010 年期间在苏州大学附属第一医院住院诊断和治疗的
急性早幼粒细胞白血病 84 例,采用患者的骨髓标本提取基因组 DNA,再以 PCR 方
法扩增目标 DNA,直接进行 DNA 测序,分析 FLT3-ITD、WT1、FLT3-TKD、TET2、
N-RAS、ASXL1、EZH2、MLL-PTD、IDH1、CBL、JAK1、DNMT3、c-Kit、NPM1、
IDH2、RUNX1 及 JAK2(V617F)等基因突变在 AML 中的作用。
结果:
84 例初治 APL 患者中,有 23 例 FLT3-ITD 突变阳性(%), FLT3-ITD
均为框内杂合突变,重复片段长短不一;12 例 WT1 突变阳性(%),9 例 FLT3-TKD
突变阳性(%), 7 例 TET2 突变阳性(%), 5 例 N-RAS 突变阳性(%), 4
例 ASXL1 突变阳性(%), 2 例 EZH2 突变阳性(%), MLL-PTD、IDH1 及 CBL
各 1 例阳性突变(%);而 JAK1、DNMT3、c-Kit、NPM1、IDH2、RUNX1、JAK2(V617F)
等常见白血病相关基因在样品中未发现突变。84 例 APL 患者发生基因突变的患者总
计 51 例,突变率为 %。
2. FLT3-ITD 突变阳性患者较野生型患者相比,明显具有高白细胞计数特点
(WBC=×109/L VS WBC=×109/L),且差异具有统计学意义(P=);而在
I
中文摘要髓系白血病的分子遗传学研究
中位年龄、血小板、血红蛋白及原始细胞百分比等方面,与野生型患者无明显差别
(P>)。 N-RAS 突变阳性患者具有低血小板计数的特点(PLT=×109/L VS
PLT=×109/L),且与野生型患者相比,差异有统计学意义(P=);突变阳性
患者的中位年龄明显偏大,但统计学无明显差异(P>);而白细胞、血红蛋白及
原始细胞百分比与野生型无明显差别。具有 FLT3-ITD 突变或 N-RAS 突变的患者总
体生存期(OS)较无相关突变组患者明显缩短(OS= 月 VS OS= 月/ OS=
月 VS OS= 月),且差异有统计学意义(P= / P=)。 WT1、FLT3-TKD、
TET2、ASXL、EZH2 等基因的突变型与野生型患者临床特征无明显差别;而
MLL-PTD、IDH1 及 CBL 等基因由于突变例数太少,和 JAK1、DNMT3、c-Kit、NPM1、
IDH2、RUNX1、JAK2(V617F)等基因一样,未与临床资料进行分析。
3. 对 84 例 APL 患者均做了染色体核型分析,单纯 t(15;17) 70 例,变异型 t(11;17)
1 例,t(15;17)伴其他染色体异常 13 例,其中+8 者 4 例,17 号缺失者 2 例,9 号缺失
者 2 例,t(7;12)者 1 例,+21 者 1 例,+15 者 1 例,-Y 者 1 例,+6 者 1 例,-6 者 1
例,7q+者 1 例,11 号缺失者 1 例。细胞遗传学与临床特征及突变的关系:附加其他
核型异常的 APL 患者与单纯 t(15;17)的患者相比,初诊原始细胞百分比、白细胞、血
小板、血红蛋白及中位年龄等临床特点无明显差异;其总生存期(OS)与单纯 t(15;17)
患者有明显缩短( 月 VS 月),但差异无明显统计学意义(P=)。附
加异常的 APL 患者发生突变的几率(6/13)并没有明显高于单纯 t(15;17)的 APL 患者
(45/71),且