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小鼠原代神经元细胞的分离.doc

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原代神经元细胞的分离培养(小鼠)本实验是自己实验室平时做的(仅供参考)实验材料的准备:出生24h以内的小鼠若干只;预冷的pbs(不含钙、镁离子);DMEM(高糖)培养液(实验之前预热);75%酒精;尖头镊子、小剪刀;含EDTA的胰酶(实验之前预热);神经元细胞培养液;:(整个操作保持无菌)取小鼠用酒精擦拭全身,用剪刀剪下小鼠头部,小心剥下头皮和脑壳后取出整个脑子放入预冷的pbs中(也可以把pbs放在冰盒上面)用剪头镊子小心剥下脑膜、(感到手很累了为止),然后用1ml枪头将其加入预热的胰酶中,反复吹打几次后放进37℃5%CO2培养箱中孵育20min,期间晃一晃有利于重复消化消化时间到了之后,用含血清的DMEM培养液终止消化后,用吸管反复吹大几次过筛网:用大概200目的筛网过滤后,计数种于培养皿中(培养皿提前一天用多聚赖氨酸包被)(6cmdish种300w个为好)24h后,换成神经元培养液,48h后加入5-氟-脱氧尿苷(终浓度20ug/ml),以后每3-4天换半液。

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小鼠原代神经元细胞的分离.doc

小鼠原代细胞的分离和计数

大鼠神经元细胞的原代培养