PCR实验室要求和基本设备.doc

PCR实验室的基本设备与要求一、 临床基因扩增检验实验室区域设置原则(一) 临床基因扩增检验实验室区域设置原则 1、 试剂储存和准备区 2、 标本制备区  扩增反应混合物配制和扩增区 4、 扩增产物分析区 如使用全自动分析仪,区域可适当合并。 (二) 各工作区域必须有明确的标记,避免不同工作区域内的设备、物品混用。 (三) 进入各工作区域必须严格按照单一方向进行即试剂储存和准备区 —>标本制备区—>扩增反应混合物配制和扩增区—>扩增产物分析区。 (四) 不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出。 二、 工作区域仪器设备配置标准 (一) 试剂储存和准备区 1、2-8C和-15C冰箱 2、混匀器 3、微量加样器(覆盖1-1000ul) 4、移动紫外灯(近工作台面) 消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心) 6、专用工作服和工作鞋 7、专用办公用品 (二) 标本制备区 1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱 高速台式冷冻离心机 3、混允器 4、水浴箱或加热模块 5、微量加样器(覆盖1-1000ul) 6、可移动紫外灯(近工作台面) 7、超净工作台 消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心) 9、专用工作服和工作鞋 专用办公用品 ,如需处理大分子DNA,应具有超声波水浴仪。  扩增反应混合物配制和扩增区 1、 核酸扩增仪 2、 微量加样器(覆盖1-1000ul) 3、 可移动紫外灯(近工作台面) 4、 消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心) 5、 专用工作服和工作鞋 6、 专用办公用品 扩增产物分析区视检验方法不同而定,基本仪器设备如下: 1、 微量加样器(覆盖1-1000ul) 2、 可移动紫外灯(近工作台面)  消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头(带滤心) 4、 专用工作服和工作鞋 5、 专用办公用品临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理(一)试剂贮存和准备区  下述操作在该区进行:贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。 贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区,不能经过产物分析区。在打开含有反应混合液的离心管或试管前,应将其快速离心数秒。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。当贮存试剂溶液经检查可用后,应将其分装贮存备用,避免由于经常打开反应管吸液而造成污染。 含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。为避免因单次反应取液而频繁的冻融主贮存试剂,应分装冰冻贮存试剂溶液。贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数来决定。 主反应混合液的组成成份尤其是聚合酶的适用性和稳定性通过预试验来检查,评价结果必须有书面报告。对于"热启动"技术(在第一个高温变性步骤后加入酶),聚合酶也可不包含在主反应混合液中。 在整个本区的实验操作过程中,操作者必须戴手套,并经常更换。此外,操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施。 严禁用嘴吸取液体,加样器和吸头等必须经高压处理。 工作结束后必须立即对工作区进行清洁。本工作区的实验台表面应可耐受诸如次***酸钠的化学物质的消毒清洁作用。实验台表面的紫外照