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硕士专业学位论文


论文题目 TLR2 和 TLR4 表达及其信号转导在新生儿
感染控制中的作用
研究生姓名刘华献
指导教师姓名汪健教授
专业名称儿科学
研究方向普外科
论文提交日期 2013 年 4 月
TLR2 和 TLR4 表达及其信号转导在新生儿感染控制中的作用中文摘要

TLR2 和 TLR4 表达及其信号转导在新生儿
感染控制中的作用
中文摘要

目的:新生儿对细菌、病毒和真菌等引起的感染高度易感,感染性疾病也是导致
新生儿死亡的主要病因之一。单核细胞是固有免疫系统中主要的效应细胞,在识别、
抗原呈递以及吞噬清除病原体方面发挥着至关重要的作用。TLRs(Toll-like receptors)
是单核细胞上表达的一类主要的模式识别受体,单核细胞依赖 TLRs 及其下游信号网
络参与到抗感染免疫应答中。TLR2 和 TLR4 不但可识别外源的病原体,还可识别内
源性物质及降解物(如细菌脂多糖、肽聚糖以及热休克蛋白等),是 TLRs 中较为重
要的两种。因此,我们将以 TLR2 和 TLR4 为切入点,研究新生儿单核细胞上 TLR2、
TLR4 的表达情况及其下游信号转导的特点,为免疫治疗新生儿感染提供新思路。
方法:收集 29 例新生儿(37 周-42 周)的脐血以及 24 例健康成人外周血,采用
流式细胞术分析单核细胞表面 TLR2 和 TLR4 的表达水平;取新生儿脐血及健康成人
外周血各 50μl,分别给予 PGN(1μg/ml)或 LPS(10ng/ml)刺激 10min,以流式细
胞术分析单核细胞中 p38 以及 p65 的活化水平;另取新生儿脐血和成人外周血各 50μl,
分别用 450μl 含 PGN(1μg/ml )或 LPS(10ng/ml)的 RPMI1640 培养基刺激 4h,收集培养
上清,采用 CBA 法(Cytometric Beads Array)检测其中细胞因子 IL-1、IL-6 的表达
水平。
结果:1. 新生儿单核细胞表面 TLR2 的平均荧光强度(±)与成人
(±)相比,未见明显统计学差异(P=);而新生儿单核细胞表面 TLR4
的平均荧光强度(±)与成人(±)相比,差异具有统计学意义
(P<)。同样,新生儿单核细胞 TLR2 阳性细胞百分比(±)与成人(
±)相比,亦未见明显统计学差异(P=);新生儿单核细胞表面 TLR4 阳性
细胞百分比(±)与成人(±)相比,差异具有统计学意义(P<)。
2. PGN(1g/ml)刺激后,新生儿 p38 活化水平为 ±,明显低于成人(
I
中文摘要 TLR2 和 TLR4 表达及其信号转导在新生儿感染控制中的作用
±),差异具有统计学意义(P<);新生儿 p65 活化水平为 ±,与
成人(±)相比,未见明显统计学差异。LPS(10ng/ml)刺激后,新生儿 p38
活化水平为 ±,明显低于成人(±),差异具有统计学意义(P<);
经 LPS 刺激后,新生儿 p65 活化水平为 ±,明显低于成人 ±,差异
具有统计学意义(P<)。3. PGN(1g/ml)刺激后,新生儿细胞因子 IL-1 的释放
水平为 ±,较成人组( ±)明显降低,差异具有统
计学意义(P<);PGN 刺激后,新生儿 IL-6 的释放水平为 ±,
成人 IL-6 的释放水平为 ±,两者相比,无明显统计学差异
(P=)。LPS 刺激后,新生儿细胞因子 IL-1 的释放水平为 ±,与
成人组(±)相比,同样具有显著统计学差异(P<);LPS 刺激后,
新生儿 IL-6 的释放水平为 ±,成人 IL-6 的释放水平为 ±
,两者相比,未见明显统计学差异(P=)。
结论:与成人相比,新生儿单核细胞表面TLRs的表达水平较低,而且TLRs下游
信号通路发育也不成熟,共同导致TLRs配体不能充分诱导新生儿单核细胞活化,释
放细胞因子不足,