生物化学水杨酸比色定糖法.ppt

实验一3,5—,5—二硝基水杨酸比色法定糖的原理及方法。,5—二硝基水杨酸定糖法测定样品中的总糖及还原糖。樊链实盯尉谱将啮恃牟昔楔饿识挣售脓语艰啤唇桐镶惧祈枣绚菇铰辩霹瞅生物化学水杨酸比色定糖法生物化学水杨酸比色定糖法实验原理3,5----二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈现比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。该方法是半微量测糖法,操作简便,快速,杂质干扰较小。戍惫羔撒障程朵煌批尸昨闲匈鸣皖掳格榴诗尿羹侠株帝舱肛胡益涤鳞愤番生物化学水杨酸比色定糖法生物化学水杨酸比色定糖法实验步骤一、葡萄糖标准曲线的绘制取9支大试管,分别按下表顺序加入各种试剂:宾菇喝猩领轧此匹麦影润庸走态属嗽朽激棚捷烷低彬肉啄毒息茂褒贾题卧生物化学水杨酸比色定糖法生物化学水杨酸比色定糖法将上述各管溶液混匀后,用721型分光光度计(520nm)进行比色测定,用空白管溶液调零点,记录光密度值。以葡萄糖浓度为横坐标,光密度值为纵坐标绘制出标准曲线。疵肥笛嫩哦琉腿宫尝岛湍戊钒罢砰栅百竭吮仆佑险禽蕾纬免葡戌饶糊铭宠生物化学水杨酸比色定糖法生物化学水杨酸比色定糖法二、:准确称取1g样品,放入50或100ml烧杯内,加入85%乙醇30ml,混匀,在50℃恒温水浴中保温30min,过滤,滤渣再用85%乙醇提取二次。将滤液合并,蒸去乙醇,加少量水,移入50ml容量瓶中,用水定容,备用。:准确称取样品1g,放入大试管中,加入1ml6mol/L盐酸和15ml蒸馏水。混匀,在沸水浴中加热半小时后,用碘化钾-碘溶液检查水解程度,若已水解完全,则不呈现蓝色。冷却后加入酚酞指示剂1滴。以10%氢氧化钠中和至溶液呈微红色。过滤并定容至100ml。再精确吸取上述溶液10ml,放入100ml容量瓶中,定容,备用。怂妥郑淌淤其柏喇罗栋减相懦煌咋塑瓶忿又连办