激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定.doc

实验名称:激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定时间:2014年6月9日星期一姓名:学号:2013**********指导老师:毛水龙老师一,实验目的掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义;熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。二,实验原理家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其;进行血糖测定。邻苯甲***方法测定血糖浓度。实验采取前后对照的方法,对家兔注射肾上腺素和胰岛素,并通过耳缘静脉采血,获取激素注射前后的血液样本,采用邻甲苯***法处理样本,最终与标品比色得出结论。:胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素,其他激素均使血糖升高。,通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶,同时抑制糖原合成酶,导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是:降低肝细胞cAMP水平,从而抑制肝磷酸化酶,激活糖原合成酶,促进肝糖原的合成;胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成,阻遏糖异生关键酶的合成;胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散,促进糖的利用。,在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟***-2-呋喃甲醛(或称羟***糠醛)。后者在与邻甲苯***缩合,生成蓝绿色的西夫式碱(Schiffbase)。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色,即可求得待测血液中葡萄糖的含量。三,:家兔两只,刀片,草酸钠,小烧杯。:①肾上腺素(1mg/lml)②胰岛素(20单位/ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤邻甲苯***-硼酸⑥5%三***醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液⑨标准葡萄糖应用液四,,实验前饥饿14~16h左右,称体重。。小刀刮去耳缘的毛,用酒精棉球擦拭使其充血,再用干棉球擦干。刀片划开耳缘静脉,使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中,注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。(),半小时后同样方法采得血液。,加5%三***,同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min,制得无蛋白血滤液(上清液)。,***试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水,试管2加入1ml标准葡萄糖应用液,试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液,试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。,取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色,空白管校正零点。:ml空白管标准管待测管甲(药前)待测管乙(药后)―--标准葡萄糖应用液(1mg/ml)---无蛋白血滤液(药前)---无蛋白血滤液(药后)---***,对家兔进行肾上腺素注射(剂量为5单位/公斤体重)并进行上述步骤,最终得出结果。五,实验结果据试验,在注射胰岛素实验中,,依照比例注射15单位的胰岛素。在注射肾上腺激素的实验中,,注射1mg的肾上腺激素。血糖测定:(