光谱法在DNA与金属配合物相互作用研究方面应用.ppt

光谱法在DNA与金属配合物相互作用的研究方面的应用报告人:一选题的由来与意义20世纪80年代中期,研究发现金属配合物与DNA的作用时,发现Ru2+、Co3+的八面手性金属配合物具有识别DNA二级结构的能力,(phen)3Cl2·6H2O等手性金属配合物与DNA的作用机理。近年发现,一些金属络合物如金属席夫碱,在氧化剂存在的条件下,能够断裂或者键合DNA。席夫碱及金属席夫碱化合物是一类抗癌药物,研究抗癌药物与DNA的相互作用机理,对选择核酸酶及抗癌药物的合成具有重要意义。,其紫外光谱在260nm附近有1强吸收峰。DNA的碱基是很多药物与DNA结合的位点。结合药物后,DNA的上述特征吸收峰会发生位移。二主要研究手段金属席夫碱的结构图对于Mn席夫碱,随着DNA的加入,其吸收光谱发生明显的减色效应,同时其234nm处的吸收峰有2nm的微小紫移。(1)用溴化乙啶作荧光试剂的原理溴化乙啶(EthBr)能插入双链DNA的碱基之间与DNA发生专一作用,因此其本身荧光强度被大大增强,达100倍,成为测定DNA及各种性质的灵敏试剂。如果某种化合物能与DNA发生类似溴化乙啶与DNA这种作用方式的反应,就会竞争溴化乙啶与DNA体系的荧光,跟踪这一体系的荧光变化,可以判断化合物是否与DNA发生作用。(2)EB和化合物的竞争实验EB与DNA发生嵌入作用使其荧光强度大增,而Mn席夫碱与DNA发生类似作用,两者竞争结合位点,减弱EB-DNA体系的荧光。pl)/c(DNA)<100为限,荧光值减弱50%作为化合物是否与DNA作用的判据。由左图可知随Mn席夫碱浓度增加,EB-DNA体系荧光强度减弱,pl)/c(DNA)=,%,表明Mn席夫碱嵌入到了DNA双链之间。右图比较了几种席夫碱与DNA相互作用的强弱,其中作用最强的为Co(II)席夫碱,最弱为Zn席夫碱.