格列卫对人卵巢癌细胞SKOV-3增殖的影响.pdf

河南科技大学
硕士学位论文
格列卫对人卵巢癌细胞SKOV-3增殖的影响
姓名:冯磊
申请学位级别:硕士
专业:肿瘤学
指导教师:田晓予
20100501
摘要
论文题目:格列卫(伊马替尼)对人卵巢癌细胞 SKOV-3 增殖的影响
专业:妇科肿瘤的基础与临床研究
研究生:冯磊
指导教师:田晓予教授
摘要
目的检测伊马替尼靶向受体在人卵巢浆液性癌细胞系 SKOV-3 中的表达,
探讨伊马替尼对人卵巢癌细胞 SKOV-3 增殖和对顺铂、紫杉醇敏感性的影响。
观察伊马替尼在体外对 PDGFR 磷酸化阻断作用,探讨其杀伤肿瘤细胞及化疗增
敏的作用机制,为临床应用伊马替尼治疗卵巢癌提供实验依据。
方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT) 快速比色法检测细胞增殖率;
Hoechst33342 荧光染色检测细胞凋亡;采用免疫荧光测定伊马替尼处理前后人
卵巢癌细胞株 SKOV-3 p-PDGFRβ的表达情况。
结果 SKOV-3 细胞增殖的影响呈现浓度依赖性,随着药物
浓度的增加,细胞增殖抑制率升高。与对照组相比,差异有统计学意义
(P<)。
细胞凋亡检测结果显示:伊马替尼可促使 SKOV-3 细胞凋亡,
且小浓度(5µmol/L)诱导的凋亡细胞数较中、高浓度组多。
、紫杉醇联合应用时,细胞增殖
抑制率随伊马替尼浓度的增加而增大,且抑制率均高于单独应用伊马替尼组
(P<),且均在伊马替尼 5µmol/L 时两药的协同作用最大。
5µmol/L 作为顺铂、紫杉醇的增敏
浓度,结果显示:伊马替尼显著增强了 SKOV-3 细胞对顺铂、紫杉醇的药物敏
感性(P<),尤其在顺铂、紫杉醇小浓度时增敏效果更佳。
,在细胞膜上表现为非磷酸化的失活状态,免疫荧
光结果显示:正常的 SKOV-3 细胞在无血清培养基中饥饿 24 小时后仅表达少量
的 p-PDGFRβ,荧光极其微弱;用人重组细胞因子 PDGF-BB100ng/mL 刺激细胞
后,在胞膜和胞浆可见到明亮的绿色荧光;伊马替尼处理细胞后,p-PDGFRβ几
乎无表达,荧光很难捕捉到。以上说明伊马替尼可在体外阻断 PDGFRβ的磷酸
化。
结论伊马替尼对 SKOV-3 细胞有明显杀伤作用,并显著增强该细胞株对顺
铂、紫杉醇的敏感性;伊马替尼可在体外阻断 SKOV-3 细胞 PDGFRβ的磷酸
化,这可能是其影响细胞增殖,发挥增敏作用的主要途径之一。
I
河南科技大学硕士学位论文
关键词:伊马替尼,卵巢癌,顺铂,紫杉醇,SKOV-3,免疫荧光
论文类型:应用基础研究
II
摘要
Subject: Research of Gleevec (Imatinib) on proliferation of human
ovarian cancer cell line SKOV-3
Specialty: Basic and clinical study on gynecological tumor
Name: Feng Lei
Supervisor: Professor Tian Xiaoyu
ABSTRACT
Objective The purpose of this research was to detect the expression of imatinib
target receptor on human ovarian cancer cell line SKOV-3 and to explore the effects of
imatinib on proliferation and sensitivity to cisplatin and paclitaxel on human ovarian
cancer cell line SKOV-3. To observe the inhibitory effect of imatinib on PDGFR
phosporylation in vitro and explore the mechanism of its anti-tumor cells and the
sensitizing effect of chemotherapy for clinical treatment of ovarian cancer with
imatinib providing experimental basis.
Methods MTT as