银杏叶提取物对缺糖缺氧%2f复糖复氧培养皮层神经元的保护作用.pfg.pdf.pdf

◆◆银杏叶提取物对缺糖缺氧/复糖复氧培养皮层神经元的保护作用中文摘要目的研究银杏叶提取物(EGB761)对体外培养神经元缺糖缺氧/复糖复氧性损伤的保护作用,并初步探索其可能的作用机制。方法利用体外培养的皮层神经元,通过去除培养液中的糖和氧(oxygen and glucose deprivation,OGD)模拟缺血缺氧,恢复糖氧供给模拟再灌注。观察 EGB761对缺血再灌注损伤的作用。第一部分:细胞分四组,分别为:正常对照组(contr01)、缺糖缺氧组(OGD)、缺糖缺氧/复糖复氧组(OGD/reoxygenation, O/R)、EGB761治疗组(EGB+O瓜)。第二部分:细胞分六组,分别为:正常对照组(contr01)、正常对照+EGB761(control+EGB)组、缺糖缺氧/复糖复氧组(O/R)、EGB761治疗组(EGB+O/R)、正常对照+Ly294002(control+Ly)组、 Ly294002处理组(Ly+EGB+O/R)。噻唑盐比色法(MTT)测定细胞活性;碘化丙锭(PI)与hoechst33258双染色观察神经元凋亡;、 Bax、Akt、ERK、P—Akt、P-ERK蛋白的表达。结果第一部分:缺糖缺氧/ ±%;±%±%(p<)I ±%。而经EGB761(浓度分别为50、150、250la g/m1)处理后,MTT值明显升高(±%、 ±%、±%):EGB761(250 edml)处理后神经元凋亡率为 +%,较缺糖缺氧/复糖复氧组明显降低(p<);±%(与缺糖缺氧/复糖复氧组比较p<):Bax蛋白在EGB76I 处理前后均无明显变化。第二部分:缺糖缺氧/复糖复氧及EGB761处理后神经元MTT值变化同实验一;缺糖缺氧/复糖复氧后神经元p-Akt、p-ERK蛋白表达明显降低,±%±%;EGB761(250u g/m1) 处理后,、±%±%(与缺糖缺氧/复糖复氧组比较p<);复糖复氧时P13K抑制剂LY294002(20 mol/L)与EGB761同时处理较单用EGB761处理无显著差别,P—Akt表达亦无明显变化;Akt、ERK表达在各组均无明显差别。结论第一部分:EGB761可拮抗缺糖缺氧/复糖复氧导致的神经元凋亡,。第二部分:EGB761对体外培养的神经元缺糖缺氧/复糖复氧损伤有保护作用,推测该作用可能与激活两条重要的生存通路,即Akt和ERK信号转导通路有关。【关键词】银杏叶提取物(EGB761);神经元:Bcl一2;Akt、ERK 2 ◆ The protected effect ofEGB761 on thecultured cortical neurons afteroxygen and glucose deprivation/reoxygenation Abstraet objection To investigate theeffectofEGB761 ollcultured cortical neurons after oxygen andglucose deprivation(OGD)and reoxygenation injury. Methods Primary ratcorticalcellswere ischemic—reperfusion model was established by deprivating both glucose and oxygen from medium,then gave glucose and PartI。the cells are divided tofourgroups:control,OGD, OGD/reoxygenation(ore),EGB761 treatment(O/R+EGB).In part II,the neurons were cultured in sixes groups: control, control+EGB761(control+EGB), OGD/reoxygenation(O/R),EGB761 treatment(EGB+