水稻花粉镜检.doc

水稻花粉镜检通过花粉活力的测定,可以了解花粉的可育性,并掌握不育花粉的形态和生理特征。在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力鉴定。掌握花粉活力的快速测定方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。Ⅰ、碘-碘化钾染色法   多数植物正常花粉呈规则形状,如圆球形或椭球形、多面体等,并积累淀粉较多,通常I2-KI可将其染成蓝色。发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,用I2-KI染色,往往呈现黄褐色。因此,可用I2-KI溶液染色法测定花粉活力。一、仪器、药品与材料(一)实验材料   各种着生花芽的植物枝条,花芽要充分发育并已含苞待放。(二)仪器与用品   显微镜,恒温箱,镊子,载玻片,盖玻片。(三)试剂   I2-KI溶液:取2gKI溶于5~10mL蒸馏水中,然后加入1gI2,待全部溶解后,再加蒸馏水定容至300mL。贮于棕色瓶中备用。二、实验步骤   :取充分成熟将要开花的花蕾,剥除花被片等,取出花药。   :取一花药置于载玻片上,加1滴蒸馏水,用镊子将花药充分捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察。凡被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。观察2~3张装片,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性。    注:此法不能准确表示花粉的活力,也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。因为核期退化的花粉已有淀粉积累,遇I2-KI呈蓝色反应。另外,含有淀粉而被杀死的花粒遇I2-KI也呈蓝色。