微生物活菌计数方法 PPT.ppt

微生物活菌平板计数方法和技术微生物肥料和食用菌菌种质检中心1微生物计数方法种类直接计数法核酸计数法活菌计数法(培养法)MPN(Most-Probable-Number):菌体较大的酵母菌或霉菌孢子细菌计数板:一般细菌用途:快速了解发酵液的菌数。常用于生产线上生产过程控制。缺点:不易区分颗粒、死菌体和杂菌,计数与真实菌数有很大差异。不能作为正规计数方法。。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。根据浊度计算出细菌的数量。该方法一般可以估计出细菌的数量级。经常用于一些特殊的微生物的快速计数,如光合细菌和藻类的测数。但是由于该方法仅能估测菌数,不能准确定量,而且由于一些颗粒和添加剂的作用,不能正确反映该样品的质量,所以在质检过程中不予采用。,小孔仅能通过一个细胞,当一个细胞通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌。因此,要求菌悬液中不含任何碎片。不适于微生物肥料产品的检测。6核酸计数法每一种生物都有一套自己独有的遗传物质,脱氧核糖核酸和核糖核酸,即DNA和RNA。随着核酸分析技术的发展,已经能够利用遗传物质对生物进行定性和定量的测定,而且更为灵敏、迅速、专一性强。常用的方法:荧光定量PCR此法操作精细繁琐,药品昂贵,而且经常受到死菌体的干扰。暂时不能成为微生物肥料活菌计数的常用方法,7大家应该也有点累了,稍作休息大家有疑问的,可以询问和交流8活菌计数法(培养法)MPN(Most-Probable-Number)最大可能数法(主要用于光合细菌和(粪)大肠菌群的测定)混菌法(适用于兼性厌氧微生物的测定),将冷却至50℃左右的15~20mL培养基倒入培养皿内轻轻混匀,培养计数。(食品中乳酸菌总菌数的测定)平板计数法(最常用的方法)9平板计数法使不可见的微生物在人工培养基平板上生长成为可见的菌落(CFU),从而可用肉眼进行观察、计数。较其他方法直观准确,是一种经典的检测活菌数的方法,也是目前国际上通用的方法。制备一定体积的菌悬液,作一系列的倍数稀释,然后将定量的稀释液进行平板培养,根据培养出的菌落数,计算出样品中的活菌数。10