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实验六聚合酶链式反应指导老师:苏乔副教授电话:84706356-606概述1、常用PCR反应条件94℃5min94℃30s72℃7min4℃∞55℃45s35cycle72℃1min退火温度根据扩增特异性调整延伸时间根据扩增片段长度调整2、防止污染,设置严格的对照体系,包括:阳性对照空白对照阴性对照植物基因组中β-actin基因片段的电泳图1-3:小麦;4-6:烟草;7-9:玉米;10-12:大豆M:DL2000E:空白对照3、如果PCR扩增出现非特异条带,解决方案包括:--、同时进行多个PCR反应,仅DNA样品不同,可配置反应混合液后分装2、常用模板量:质粒DNA植物DNA可设计梯度实验进行优化思考题1、如何确定PCR反应体系正常且无污染?2、如果PCR扩增中出现非特异条带,其可能的原因是什么?应如何解决?再见!
实验六聚合酶链式反应 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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