实验四 酶的特性实验.doc

。说明:本实验由四个小实验组成,其中第一个实验(酶的专一性)必做,其他三个小实验选做(至少做一个)可以只写需要做的实验内容!写实验报告时,实验四酶的特性实验一、实验目的酶是生物催化剂,生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验内容本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。(一)酶的专一性1、实验原理本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜,能氧化具还原性的糖,生成砖红色沉淀氧化亚铜。2、材料、仪器与试剂(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架;(3)试剂:2%蔗糖溶液;%%淀粉溶液;班氏试剂。3、实验操作(1)稀释唾液的制备①唾液的获取用一次性杯取一定量的饮用水,漱口以清洁口腔,然后在嘴中含10-20ml饮用水,轻漱2min左右时间,即可获得唾液的原液,内含唾液淀粉酶。②不同稀释度唾液的制备(用大试管)本实验需制备1:1、1:5、1:20、1:50、1:200等五个不同浓度的稀释唾液。精选资料,欢迎下载。举例说明:1:5指的是稀释了5倍的唾液,制备方法为1份原液+4份蒸馏水。1:20指的是稀释了20倍的唾液,制备方法为1份1:5的稀释液+3分蒸馏水。(2)唾液淀粉酶最佳稀释度的确定(严格按表1添加顺序做实验,用小试管做实验)表1唾液淀粉酶稀释度的确定管号1(1:1)2(1:5)3(1:20)4(1:50)5(1:200)%淀粉溶液(滴)44444稀释唾液(ml)1111137℃恒温水浴中保温5分钟班氏试剂(ml)11111分钟沸水浴2~3实验结果(2)淀粉酶的专一性淀粉酶专一性实验表2管号123456(滴)%淀粉溶液4-4-4-2%蔗糖溶液(滴)-4-4-4最佳稀释度唾液(ml)--11――)(煮沸过的最佳稀释度唾液ml----11)蒸馏水(ml11----分钟37℃恒温水浴中保温5ml)班氏试剂(1111113分钟~沸水浴2实验结果(二)温度对酶活力的影响1、实验原理淀粉和可溶性淀粉遇在最适温度下,酶的催化作用受温度的影响。酶的反应速度最高。碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合不呈颜色,在不同温度下,麦芽糖遇碘也不呈色,精选资料,欢迎下载。物遇碘呈现的颜色来判断。2、材料、仪器与试剂(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器:试管及试管架;恒温水浴;冰浴;沸水浴;(3)试剂:%%淀粉溶液;KI-I2碘溶液;3、实验操作取4支干燥的试管,编号后按下表加入试剂:表3温度对酶活力影响实验加样顺序管号123淀粉溶液(ml)%(ml)11ml)煮沸过的稀释唾液(1实验结果、号试管放入冰水中。摇匀后,将1、3号试管放入37℃恒温水浴中,210分钟后1、2号管内淀粉