人γ干扰素(IFN-γ).doc

人γ干扰素(IFN- γ) 酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人γ干扰素(IFN- γ), 只能用于研究用途, 不得用于医学诊断。用途: 用于人血清、血浆及相关液体样本中γ干扰素(IFN- γ)的测定。工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA )测定样品中人γ干扰素(IFN- γ)的水平。向预先包被了人γ干扰素(IFN- γ)单克隆抗体的酶标孔中加入γ干扰素(IFN- γ),温育;洗涤后,加入 HRP 标记过的γ干扰素(IFN- γ)抗体。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物 A、 B,产生蓝色, 并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人γ干扰素(IFN- γ)的浓度呈正相关。试剂盒组成 1 标准品( 3200ng/L ) 7 显色剂 A液 6ml 2 标准品稀释液 3ml 8 显色剂 B液 6ml 3酶标包被板 12孔×8条9 终止液 6ml 4 酶标试剂 6ml 10 说明书 1份 530 倍浓缩洗涤液 20ml 11 封板膜 2张 6 样品稀释液 6ml 12 密封袋 1个需要而未提供的试剂和器材 ℃恒温箱。 。 , -8 ℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少 30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 ,并经常校对其准确性,以避免试验误差 3. 建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数( n 倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 ,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. ,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。 。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 B对光敏感,避免长时间暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少 ml注入孔内,浸泡 1-2 分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP )活性。 ,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20 ℃保存,但应避免反复冻融操作程序 1. 标准品的稀释( 本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明在小试管中自行倍比稀释): (空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入稀释好的标准品 50μl ;在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5倍)。轻轻晃动混匀,37℃温育 30分钟。 , 甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡 30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复 5次,拍干。 50μl,空白孔除外。轻轻晃动混匀,37℃