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论著·
巴豆生物碱抑制卵巢癌细胞增殖和诱导其凋亡的实验研究
赵小迎,陈俊,蔡平生
【摘要】目的了解巴豆生物碱诱导人卵巢癌细胞一细胞周期、凋亡效果,以及凋亡与增殖细胞核抗
原表达之间的关系。方法将浓度分别为、和的巴豆生物碱作用于人卵巢癌细胞一
细胞后,采用流式细胞术检测巴豆生物碱对人卵巢癌细胞一细胞的增殖抑制作用和诱导细胞凋亡;采用
倒置显微镜及免疫组织化学法对凋亡调节基因表达进行检测。结果巴豆生物碱作用后,倒置显微镜下可
见细胞皱缩、出芽及少量凋亡小体形成。应用不同剂量的巴豆生物碱~ / 分别作用于一细胞
、、后,巴豆生物碱抑制了一细胞增殖,并呈现剂量、时间依赖性。随着巴豆生物碱的作用时间延
长,/期细胞比例明显下降, 而较多的细胞阻滞于/ 期。巴豆生物碱的作用浓度从增至/,
则平均细胞凋亡率从.% 上升为.% 。结论巴豆生物碱可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞/
期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人卵巢癌细胞一细胞凋亡。由于在~期进程过度中起着
重要作用,表达的下调也导致细胞周期进程被阻抑。巴豆生物碱作用,随浓度的升高, 阳性细胞百分
率逐渐降低。
【关键词】巴豆生物碱;细胞凋亡;细胞周期;卵巢肿瘤;增殖细胞核抗原
【中图分类号】. 【文献标识码】【文章编号】———
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目前对于晚期患者临床应用最广泛的治疗方法是以顺铂为癌治疗领域亟须解决的课题。从植物中寻找抗癌成分已成为现
基础的联合化疗,但这些化疗方案对卵巢癌患者的总体生存率在探索新药的重要途径之一,巴豆系大戟科植物巴豆的种子,
并无明显改善,寻找理想的化疗药物和化疗方案已经成为卵巢味辛。其提取物巴豆生物碱对甲状腺癌、胃癌、肝癌等多种肿
瘤具有治疗作用已从化学、药理和临床等多方面研究确定。本
实验以人卵巢癌细胞一为研究对象,观察巴豆生物碱
基金项目:温州市年第二期科技计划项目
对其作用,并对其相关机制进行探讨,为巴豆生物碱应用于卵
作者单位:浙江省温州市,温州医学院赵小迎,现就职
巢癌的临床治疗奠定理论基础。
于温州中西医结合医院妇产科;温州医学院免疫教研室陈俊;温
材料与方法
州中西医结合医院妇产科主任医师蔡平生
. 材料细胞:人卵巢癌细胞一,购自中科
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院上海细胞所; 主要药品及试剂:巴豆生物碱, 组加入等量含相同浓度的培养液。作用后终
碘化丙锭、—凋亡检测试剂盒、免疫止培养。按试剂盒说明书进行操作,以代替一抗作阴性
组化检测试剂盒、流式细胞仪。对照,阳性结果为细胞核内出现棕黄色颗粒,阴性对照中无上
. 方法述颗粒出现。阳性表达率% 阳性细胞
.. 细胞培养常规培养用培养基,加入% 总细胞数% 。
胎牛血清,于。、%孵箱孵育,密切观察细胞生长情. 统计学方法全部数据经流式细胞仪和
况,每换液一次,待细胞融合达% ~%时传代。倒置软件获取,每管样品检