RNAi沉默WT1基因逆转恶性黑素瘤细胞耐药性研究.pdf

大连医科大学
硕士学位论文
RNAi沉默WT1基因逆转恶性黑素瘤细胞耐药性的研究
姓名:翟瑞峰
申请学位级别:硕士
专业:皮肤病与性病学
指导教师:高明阳
20090601
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沉默蚰孀6裥院谒亓鱿赴鸵┬缘难芯翟瑞峰教授皮肤病与性病学硕士生姓名:指导教师:指导小组:专业名称:高明阳摘要目的:恶性黑素瘤是一种高度恶性的皮肤肿瘤,其对常规化疗药物的耐药性严重影响其预后,因而逆转肿瘤细胞的耐药性,以提高化疗疗效,是治疗恶性黑素瘤的重要课题。目前认为恶性黑素瘤耐药的主要机制是凋亡抑制,越来越多研究证实特异性下调某些凋亡抑制基因以促进肿瘤细胞凋亡,可以增加恶性黑素瘤对化疗药物的敏感性。蜃早发现作为一种抑癌基因参与’龅姆⑸昀囱芯恐な礧基因在多种实体瘤细胞中高表达,具有抑制肿瘤细胞凋亡作用,发挥癌基因的作用。国外研究发现蛟ヒ陨隙裥院谒亓鲋斜泶铮良性色素痣和正常皮肤中未见表达,下调蚩梢砸种贫裥院谒亓细胞增殖,促进细胞凋亡。但抑制虮泶锬芊衲孀6裥院谒亓鱿胞的耐药性尚未见报道。扇偶际跏墙昀捶⒄蛊鹄吹幕虺聊技术,能高效,特异地抑制目的基因的表达,因此很快成为研究基因功能的重要工具。本研究旨在探讨利用扇懦聊琖基因对人转移性恶性黑素瘤赴ぃ蛲黾捌涠运巢舾行缘挠跋欤6菇ㄕ攵訵基因的婧吮泶镌靥澹弥侍褰玸真核表达载体转入恶性黑素瘤中,并检测转染效率:肦狿、瓸懊庖呦赴旧ǚ椒ḿ觳釽细胞中騧暗鞍姿降谋泶铮舛ɑ虺聊Ч肕法测定赴で撸肕法检测性黑素瘤的基因治疗提供理论依据。方法:赴缇迪鹿鄄煜赴蛲鲂翁赴曰埔┪锏拿舾行浴
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晒菇ò邢騑基因的婧吮泶镌靥澹甊甈检测显示蛟诙裥院谒亓鯳弥侍逦T靥褰玸真核表达载体转染甊干扰沉默蚩梢种葡赴鲋常俳赴蛲觯缇迪驴梢钥吹降蛲鱿赴⑷廾ḿ跎伲赴斯趟酰旧灞呒畇实验组细胞从痬抵./,逆转倍数邢騑的序列特异性上灾种芖基因的表达;赴鸚基因表达可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;甊干扰靶向沉默稍黾覹赴运巢拿舾行裕扇偶际跷6裥院谒亓龅闹瘟铺峁┝诵峦揪丁关键词:结果:赴懈弑泶铮赴染率为%,转染后细胞中表达水平下降%,蛋白表达水平下降%;笛樽閃赴运巢拿舾行栽黾印结论:碌鱓耐药性恶性黑素瘤
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姐年三月卫学位敝作者签名:塑逸牢一独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签字期:
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论文作者签名:霾垒曼奎指导教师签名:垒型亚缝签字日期:如埤一年三月旦曰关于学位论文使用授权的说明泄跗诳光盘版缱釉又旧纭!!吨泄┦垦宦畚娜泄蒲Ъ际跣畔⒀芯克!!吨泄宦畚娜氖菘狻《沉默蚰孀6裥院谒亓鱿赴鸵┬缘难芯俊废当救嗽大连医科大学攻读硕士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本人及指导教师完全了解大连医科大学关于保存、使用学位论文的规定,同意学校保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版本,允许论文被查阅和借阅,同意学校将本论文加入:文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》及相关数据库。彝际楣本人授权大连医科大学,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文,可以公布论穸的全部或部分内容。
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蛴攵裥灾琢龅墓叵翟瑞峰审校综述高明阳蚴亲钤绶⑾钟隬痵瘤发生发展相关及基因,首先由】等人分离克隆出这个基因。具有抑癌和原癌双重活性的基因,该基因在’鲎橹赴⒎⒂械呐咛ド觥⒚谀蛏翅罩芯煞⑾郑一些泌尿生殖系统发育异常的疾病中也可查出笔Щ虻阃槐洹=研究发现诙嘀职籽2〖笆堤辶鲋幸斐8弑泶铮谙赴鲋臣暗蛲恶性肿瘤的关系作一综述。一、虻慕峁褂牍δ蛭挥湃旧宥瘫区ぴ衛霭被幔莆因剩下鐾庀宰樱’端的鐾庀宰痈霰嗦胍桓鲂恐附峁梗餐钩梢个可结合目标男恐傅鞍住R桓鐾庀宰颖嗦胍桓鲂恐阜从承恐附峁故虮嗦胍桓龀ぴ鞍字剩然擞个可分别螯合一个锌离子的锌指结构,各由霭腚装彼岷个组氨酸组成,锌指蛋白是结合墓δ芮颍被烁缓彼帷⒐劝彼帷⑺堪彼岷透拾彼,是功能的效应区。第庀宰颖嗦氲霭被幔貌逶诟彼岬陌基端,第庀宰颖嗦氲睦蛋保瞻彼幔堪彼幔挥诘、恐钢洹A种剪接形式使诹覦特性方面及调控基因转录方面作用不同。鞍啄苡胄矶嗌さ骺匾蜃踊蚣捌涫芴褰岷希缫鹊核匮因子、胰岛素样生长因子芴濉⒀P“逖苌ひ蜃覣、表皮生长因子、转化生长因子⑽谼受体、单核巨噬细胞集落刺激因子.、视黄酸受体、和虻龋约白陨砀缓癎的同源序列,从而影响这些靶基因的启动子活性,调节这些细胞生长因子中发挥重要作用,具有癌基因作用,引起学者关注,本文重