白血病融合基因.docx

bcr/abl 融 合 基 因
慢性粒细胞白血病(Chronic Myelogenous Leukemia,CM)是一种发生于造血 干细胞的血液系统恶性克隆增生性疾病。在受累的细胞系中可找到 Ph标记染色 体或(和)bcr/abl基因重排。
基因结构
人abl基因位于9号染色体长臂，有1b、1a和2-11共12个外显子。转录 始自1b或1a，形成的两种mRNA长度分别为7kb和6kb，合成的两种蛋白质分 子量均约为145,前者定位于细胞膜，而后者主要在细胞核内。abl主要结构有N 端的肉瘤同源2(srchomology,SH2、SH1。SH2结合磷酸化的酪氨酸残基，SH1具 有酪氨酸激酶活性。近C端富含酸性氨基酸残基，可结合 DNA。abl蛋白参与细 胞周期调节。在GO期，abl-Rb蛋白复合物与DNA结合。在GPS转变过程中， Rb被磷酸化，abl与之分离，并激活，使RNA聚合酶磷酸化，促进转录，细胞进 入S期。
bcr基因位于22号染色体长臂，有23个外显子。蛋白产物分子量均为160。 bcr蛋白第1-63个氨基酸是二聚体化结构，参与 bcr蛋白多聚体的形成。bcr蛋 白参与细胞周期调节，但详细过程还不十分明确。 bcr基因断裂点集中在三个区
域：主要(major bcr,M-bcr)、次要(minor bcr,m-bcr)和 卩(片bcr)区域。abl 基 因断裂位于第1或第2内含子。因断裂点不一，bcr/abl融合基因及其mRNA和 蛋白产物呈多样性。CML的bcr基因断裂点常位于 M-bcr，主要是b2a2和b3a2， 蛋白分子量为210kb。bcr基因在ALL中大约2/3为m-BCR位点。Ph1染色体和 bcr/abl融合基因是CML的分子基础，并可作为区分典型CML和非典型CML的诊 断指标。
由于t(9; 22)(q34; )而产生的费城染色体(Ph)在血液肿瘤中具有重 要的诊断和预后意义，出现于 90%以上的CML、30%的***ALL 2%-10%的儿童 ALL以及少数的 AML和MM患者。位于9q34的ABL基因与位于22q11的BCR 基因相互易位，形成bcr/abl融合基因。此基因产生一种新的 mRNA,编码的蛋 白为P210。P210具有增强酪氨酸激酶的活性，改变了细胞多种蛋白质酪氨酸磷 酸化水平和细胞微丝机动蛋白的功能，从而扰乱了细胞内正常的信号传导途径， 使细胞失去了对周围环境的反应性，并抑制了凋亡的发生。具有BCR/ABL®合基 因的患者预后差。
基因检测
Southern Blot
即DNA印迹，可以对bcr-abl融合基因DNA重排进行分子生物学检测。将经 限制性内切酶酶切及琼脂糖电泳分离的 DN***段转移到固相杂交膜上，胚系DNA 会产生特征性片段，但发生过基因重排的细胞 DNA因酶切位点有所改变会产生
有别于胚系的DNA酶切片段。 点集簇区(M-bcr、。从白血病患者白细胞中抽提的基因组 DNA,经一组限制性内 切酶消化及琼脂糖凝胶电泳分离后转移到尼龙膜上， 用取自M-bcr3和5'端的bcr
探针与之杂交。放射自显影洗片后即可显示所要检测的条带，对于 CML患者，
除可见到一条与胚系bcr基因组DNA相对应的条带外，其他的条带