盾叶薯蓣组织细胞培养研究.pdf

陕西师范大学
硕士学位论文
盾叶薯蓣组织细胞培养的研究
姓名:强小利
申请学位级别:硕士
专业:植物学
指导教师:王喆之
20040501
或帷/嘌希捎盏疾倭康牟欢ㄑ俊盾叶薯蓣组织细胞培养的研究摘要:,为多年生缠绕草质藤本植物,其根茎中含有丰富的薯蓣皂甙元,可用于合成避孕药及甾体激素类药物嘀郑且恢种匾5募に乩嘁┰粗参铩R盾叶薯蓣的叶片、茎段、带腋芽的茎段、根茎和花药为材料,系统研究其组织细胞培养技术,建立其相应的植株再生系统和细胞培养物繁殖体系,并对其褐化现象进术繁育盾叶薯蓣的优良种苗还是利用细胞培养生产有效活性物质均有~定的意义。织培养方法和再生技术,获得了大量的试管苗。以为基本培养基,附加籇被诱导产生丛生芽,分化率为ィ欢ㄑ靠山⒂擅纭7只拿缁蚱渚ザ远芤妒磔髟偕逑到⒐讨谐鱿值暮只窒蠼辛顺醪降难芯浚⑾衷笤僮R圃诠庀屡嘌保捎行У胤乐购只姆⑸增加培养基的硬度和缩短继代周期都可以有效的防止褐化现象。导产生愈伤组织,将愈伤组织移至为基本培养基附加远芤妒磔魇怨苊缫圃越醒芯浚峁⑾郑旱笔怨苊缭谏嘌仙缓蠼谐9媪蹲隆4∶缟そ∧岛螅芯苛瞬煌掷嗪团ǘ鹊闹参锷さ鹘诩炼远芤妒磔鞯挠俗橹惺磔髟甙元积累的影响,发现在以为基本培养基,附加瓺行了初步研究,以及从其培养物中提取有效成分薯蓣皂甙元,无论是对应用生物技本实验的结果如下:低逞芯苛硕芤妒磔饕镀⒕ザ巍⒋秆康木ザ巍⒏ズ突ㄒ┪M庵蔡宓淖适于带腋芽的茎段愈伤组织的诱导,,倍数可达倍左右。在附加甇/琋/呐嘌希俗橹在以为基本培养基,附加甇!基上适于根的诱导,诱导率在%以上。以为基本培养基附加较高浓度的..∥时,并添加酪蛋白,并在暗培养枚芤妒磔鞯幕ㄒ┪M庵蔡澹笛榱瞬煌に刈楹隙远芤妒磔骰ㄒ┡嘌挠响,发现在以为基本培养基附加/.∥呐嘌希捎螅嘌愿桑嘌恳浦磷匀还庀卵被缓蟠蚩F扛牵檬怨苗逐渐适应自然条件,继续炼茁定植于大罔中。盾叶薯蓣组培苗移栽成活率可达%左右。强小利/騅笤鲋/呐嘌几、//
蓣皂甙的前体物质——胆固醇的培养基上,薯蓣皂甙元的含量为ァR源宋6哉眨芯糠⑾衷诘ザ捞砑邮上的愈伤组织中薯蓣皂甙元的含量有所增加,均高出对照愈伤组织中薯蓣皂甙元的关键词:盾叶薯蓣、组织培养、植株再生、薯蓣皂甙元蛘咭蚁├嘌含量,分别为ァ.%和ァ郊覩
.鎡琣./琣,.疞、’.ィ瑆%..:瓺甀,.琾瓵琣:乃,,甇/琋/畉/甋甌甌:,籇/緂/.
.,.%.ィ.%,絘ィ珿甌山:,—甌.,,
缩略表曲培养基钒被堰赤霉素高效液相色谱卉邪被堰缺窖跻宜烈宜玉米素吲哚乙酸吲哚丁酸酪蛋白..一
言文献综述引近年来,植物组织和细胞培养作为植物生物技术的一个必不可少的手段及重要组成部分,已渗透到生物学科的各个领域,成为重要的研究技术和手段“。这一技术体系的建立,不仅对于研究植物细胞的分化与脱分化,各种组织、器官的形态发生与建成以及植物的发育生理,各种代谢调节机理及基因表达和调控规律等众多问题具有重要的意义,同时还可以从多条途径直接服务于生产实践。二十世纪至年代植物组织培养技术迅速崛起,在此基础上进而发展起来的植物细胞工程和基因工程己经成为现代生物技术的核心,并由此产生了一个全新的技术群,包括各种珍稀名贵植物的快速繁殖技术、茎尖脱毒技术、原生质体培养与体细胞杂交技术、花药培养与单倍体生产技术、体细胞突变体的诱发及筛选技术、细胞、组织培养物的超低温保存技术、人工种子技术、细胞大规模培养与次生代谢物的工厂化生产技术、植物基因工程技术等等@弥参镒橹嘌际踉偕株的植物种类和品种日渐增多,植物组织培养技术的应用也越来越广泛,同时这一新兴技术群的发展也带动了相关产业的发展,并在多项生产实践中取得了较好的经济效益。因此,植物组织培养的研究,己经成为当代生命科学中最有希望的研究领域之一,是现代生物技术的重要组成部分,具有十分广阔的开发应用前景。盾叶薯蓣是我国特有的药用植物,所含薯蓣皂甙元是合成甾体激素药物的主要培养技术生产皂甙元的可能性。系统研究盾叶薯蓣的组织培养,建立其相应的再生体系并筛选合适的培养条件生产其有效成分,无论是对应用生物技术繁育盾叶薯蓣的优良种苗、保护种质资源还是利用细胞培养生产有效活性物质等均有重要植物组织培养与细胞工程研究概况和作用植物组织培养是指在无菌条件下,将离体的植物器官茎、叶、花、果实、种子等⒆橹如形成层、花药组织、胚乳、皮层等⑾赴体细胞和生殖细胞约霸侍澹嘌谌斯づ渲频呐嘌希枋实钡呐嘌件,使其长成完整的植株,统称为植物组织培养。由于培养的是脱离植物母体的培养物,所以也叫离体培养或试管培养用自制的显微镜观察了软木塞的薄片,第一次描述了植物细胞的结构。年动物学家参镅Ъ襍噜建立了细胞学说【