食品样本中菌落总数和大肠杆菌微生物分析的微生物研究方法.pdf

Summary of The Micro Biological Survey Method for microbiological 
analysis of Total Viable Count and E. coli in Food Samples 
食品样本中菌落总数和大肠杆菌微生物分析的微生物研究方法 
论文摘要 
 
1. 罗马大学生物系,00146  罗马,意大利 
2. MBS 有限公司,00131  罗马,意大利 
3. 德国皇家生物科技,14469  波斯坦,波茨坦,勃兰登堡,德国 
 
 
 
引言 
在食品安全的卫生控制过程中,菌落总数(TVC)和大肠杆菌()的检
测尤为重要。TVC 针对动物机体中嗜温需要微生物含量给出数量上的判断。这对
不同食品中微生物质量的评估提供了重要的理念,同时也可以用以判断食品的新
鲜程度。大肠杆菌()是哺乳动物和鸟内肠道正常的微生物群落的一部分。
在 19 世纪初,大肠杆菌()被确认为判断排泄物污染的好的指示物。标准
化方法(如 ISO 方法)被作为官方控制的参考分析法。这些标准化方法是基于被
广泛用于食品分析实验室的传统微生物培养标准方法。这些技术呈现出几点困
难,如在获得确定的分析结果需要很长的时间(3‐7 天)。在这样的背景下,我们
发明了参考方法替代方法,称之为 MBS  检测法。这种方法通过比色的快速系统
来检测于农产品、水和环境样本中的微生物。MBS 检测法包含用于溶解的分析
试剂、即时可用的用于微生物快速分析的反应瓶。分析基于瓶内样本中含有的微
生物引起的瓶中物质的颜色变化。整个分析过程即使没有受过专业训练的人也可
以在任何地点进行实验操作,同时除恒温器外无需任何其他的实验设备。MBS
检测法测量细菌新陈代谢途径中氧化酶的催化反应,在这个反应中我们观察到样
本中的活细胞数量与酶的反应呈现明确的相关性。颜色变化所需的时间与样本中
细菌存在量的对数函数成线性负相关关系;例如酶的反应,细菌的数量越多,颜
色变化所需时间越短。
结论 
1) 对水样人为污染后的统计分析 
用 MBS 检测方法测量的 TVC 和 的统计分析是将十个不同样本十次
不同稀释以 ISO/TR  13843(2000)、培养基法、ISO9998(1991)作为参考方法。
MBS 方法操作可靠性的限值若以培养基法作为参考,范围在 1×107 和<10 
CFU/ml。统计分析结果如以下几方面所示:⑴精确度估计;⑵变异数;⑶不
确定性。精确度的总体估计根据 ISO/TR 13843(2000),使用 ANOVA 分析。根
据单边方差分析和双边方差分析都表明:在用 MBS 方法所得的微生物检测结
果与用其他参考方法相比不存在统计上的差别。使用 MBS 检测法进行细菌计
数的可靠性根据 ISO/TR 13843(2000)用变异数(CV 值)来进行检定。检定的结果
MBS 检测法比其他参考方法更具可靠性。同样,根据 ISO/TR13843(2000)用χ2
统计检测结果,用 MBS 检测法进行菌落计数的不确定性小于其他参考检测法。