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无菌药品包装容器的密封性验证方案
无菌药品包装容器的密封性验证方案
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概述：无菌药品的容器应能在整个有效期内有完好的密封性， 防止微生物的浸入。药品包
材的设计及选择要考察相互的配合情况。无菌容器 /密封件系统的完整性测试可以在培养基 灌装时进行。
目的：评估产品包装的密封性，以充分保护产品在储存期的无菌状态。
依据：《药品生产质量管理规范》2010修订版：附录1:第九十五条 无菌药品包装容器 的密封性应经过验证，以避免产品遭受污染。
责任：质量部、生产部对本验证负责。
微生物浸入试验法验证密封完整性：
往产品容器内灌入培养基并按照常规方式压塞封盖， 灭菌后冷却备用。将冷却后的容器倒 置并将瓶口完全浸没于高浓度(108CFU/ml )的运动性菌液中，4小时后，将容器外表面消 毒并培养，看是否有挑战性细菌在容器内生长。
多准备一些灌装培养基的样品，在与产品相同地的贮存条件下贮存。 在贮存的一定时间间 隔(12,24，36和48个月等)，取出部分样品，进行微生物浸入试验，以确定密封系统在 贮存期内的有效性。
范围：西林瓶、胶塞及铝盖的密封性验证，共有 10ml及2ml两种规格。
用品：胆盐乳糖培养基 铜绿假单胞菌(ATCC 9027) 乙酸 异丙醇
实施：
制备样品：
取已经按相应清洗灭菌操作规程制备好的西林瓶、胶塞及铝塑组合盖 150 套，西林瓶内 灌装入已灭菌的胆盐乳糖培养基，在正常生产线上抽真空、压塞、轧盖。将每一试样品倒转， 使培养基与西林瓶内表面及胶塞充分接触， 在30〜35 °C竖立倒置培养14天，培养基应澄清，
无菌落生长。
制备微生物菌悬液：
从铜绿假单胞菌（ ATCC 9027 ）的新鲜斜面上取培养物，分别接入含 6ml 无菌胆盐乳糖 培养基的试管中，在30〜35 C下培养18〜24h ;将每管的培养物分别转入含 600ml相同培 养基的容器内，于30〜35 C下培养（约24小时），在培养结束时，能明显见容器内培养基 出现浑浊，计数，当菌落数大于 1 0 8CFU/m l 时，停止培养，待用（在微生物侵入试验开始， 所用菌悬液浓度（活菌数）必须达到 1 XlO8CFU/ml。）。
营养试验：
该实验目的是确认胆盐乳糖培养基对铜绿假单胞菌促菌生长能力。 所有样品培养14天均不长菌时，从上述 20个带盖试验样品，每个试 验样品内接种100CFU铜绿假单胞菌。在30〜35 C下培养7天，或培养至所有试样品都呈 阳性结果。
结果判断：
若 7 天内，所有接种铜绿假单胞菌的试验样品中，微生物生长良好，则容器内培养基的促 菌生长能力可判为合格。使用革兰染色镜检，置于紫外灯下，培养基呈蓝绿色荧光，则确认 试验样品容器内生长的菌为接入的铜绿假单胞菌，即为阳性。
若 7 天内，所有接种铜绿假单胞菌的试样品中，微生物生长条件不好或经鉴别后受其它菌 种污染，则试验失败，需重新作营养试验
:
（ATCC 9027 ）的菌悬液倒入适当的容器内，从上述 只试验样品倒置于菌悬液中，