反相高效液相色谱法测定雪碧中苯甲酸.doc

分 析 化　学　实　验　报 告
实 验 名　 称:反相高效液相色谱法测定雪碧中的苯甲酸 　
　 　　 　 　 　　 　 　　 　 　 　 　 　　 　 　　　 　 　 　　 　　 　 　 　　　 　　 　 　　
专　 　 业： 化学教育 　　 　
班 　 　 　 　级: 　 　11化学班　　　 　　 　
姓 　 名： 　 　 　 　　　　　 　 　
指 导 教 师： 郭老师 　
日　 　　 　 期: 　 　　　 　 　
一、实验目的
　 1、学****高效液相色谱仪的操作。
　 　 2、了解高效液相色谱法测定苯甲酸的基本原理.
　 　 ３、掌握高效液相色谱法进行定性及定量分析的基本方法。
实验原理
　 　 苯甲酸为具有苯或甲醛的气味的鳞片状或针状结晶,具有苯或甲醛的臭味。℃,沸点249℃，（1５／４℃)。在100℃时迅速升华，它的蒸气有很强的刺激性，吸入后易引起咳嗽。微溶于水，易溶于乙醇、***等有机溶剂。苯甲酸是弱酸,。在酸性条件下,对霉菌、酵母和细菌均有抑制作用，但对产酸菌作用较弱。～，～5．０为宜。在食品工业用塑料桶装浓缩果蔬汁，最大使用量不得超过2。0g/kg；在果酱（不包括罐头)、果汁(味)型饮料、酱油、食醋中最大使用量１。0g／kｇ；在软糖、葡萄酒、果酒中最大使用量0。8g/ｋg；在低盐酱菜、酱类、蜜饯,最大使用量０。5g／kｇ；在碳酸饮料中最大使用量0。2g/kg。
　 用高效液相色谱法将饮料中的苯甲酸与其它组分（如:柠檬酸(钠)、蔗糖等)分离后，将已配制的浓度不同的苯甲酸标准溶液进入色谱系统。如流动相流速和泵的压力在整个实验过程中是恒定的，测定它们在色谱图上的保留时间t
R和峰面积A后，可直接用tＲ定性,用峰面积A作为定量测定的参数,采用工作曲线法（即外标法）测定饮料中的苯甲酸含量。
三、仪器和试剂
　 1、Ａgiｌent　1２20高效液相色谱仪。
2、色谱柱：Kromａｓil C18,5µ　1５０×4。6mm.
3、流动相:75%甲醇（色谱纯)+25％PH=（过三次）。
　　 ４、苯甲酸标准贮备溶液:准确称取0。0１０9g含量9９．5％苯甲酸，用过三次的蒸馏水溶解，定量至50mL容量瓶中，并稀释至刻度。标样浓度２17μg·mL－1.
4、测饮料试液：雪碧
四、实验内容
、0．８6８、、4．34、８。6８、、·ｍL－1的标准系列溶液，并贴上标签。（稀释为50mＬ）
谱仪器条件:
泵的流速:;检测波长:２54nｍ；进样量:20μＬ；柱温:室温。
仪器基线稳定后，进苯甲酸标准样，浓度由低到高.
品处理如下:（1)将约１00ｍL雪碧置于一