杂色曲霉素对体外培养GES-1细胞CyclinB1、Cdc2和Cdc25C表达影响的研究.pdf

河北医科大学
硕士学位论文
杂色曲霉素对体外培养GES-1细胞CyclinB1、Cdc2和Cdc25C表达
影响的研究
姓名:王娟
申请学位级别:硕士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:张祥宏;邢凌霄
20090301
杂色曲霉素对体外培养赴鸆和表达影响的研究期研究发现可诱导并促进小鼠大脑细胞、肾脏细胞和肝脏细胞的凋亡,并抑制肝细胞的增殖;诱导体外培养人外现细胞增殖活性增高。近期研究发现,,摘要目的:杂色曲霉素琒是由杂色曲霉、构巢曲霉等真菌所产生的一种具有致癌性的真菌毒素。广泛存在于自然界中,是动物和人类食物中常见的污染物之一,在我国胃癌高发区慢性胃病患者胃液内的检出率及粮食中的污染率均很高。国内外研究表明,可引起小鼠肺腺癌和腺胃黏膜上皮异型增生,⑾赴癌变。肿瘤是以细胞生长失控为主要特征的,细胞在增殖、分化和凋亡方面的异常都可能导致肿瘤的发生和发展。目前认为细胞周期紊乱是肿瘤重要的发生机制。本实验室前周血淋巴细胞发生凋亡;诱导体外培养人胚胃黏膜细胞出诱导细胞周期发生期阻滞。但诱导细胞发生期阻滞的机制目前尚不清楚。/谑窍赴芷诘骺氐阒唬窍赴鲋车闹匾中文摘要
阶段。真核细胞中,.。疌怯蒀せ畲而促进细胞从期进入冢珻幕钚允窍赴期进入诘墓丶弧因此,在前期研究的基础之上,本实验研究了对体外培养胃黏膜上皮细胞的、、表达的影响,以期探讨期阻滞的相关分子的变化在诱导胃黏膜上皮细胞期阻滞中的意义。方法:赴嘌氪细胞培养于含%胎牛血清、/嗝顾亍疞链霉素的培养基中,℃、培养,细胞贴壁生长。选择对数生长期的细胞ù婊治?瞻对照组、溶剂对照组、实验组。实验组给予溶解、生理盐水稀释的,使其终浓度分别为、、/哉兆楦璧忍寤硌嗡芗炼哉兆楦等体积溶液,继续培养占赴邢喙刂标检测。鞍酌庖哂〖提取细胞总蛋白,用蛋白免疫印迹方法,检测处理后人胃黏膜上皮细胞中、/磷酸化型和/姿峄虲谋泶锴榭觥赴躌的提取、鉴定及定量采用异硫氰酸胍一步法提取细胞总%琼脂糖中文摘要
作为内参照,经图像分析系统对杂交条带进行定量分析,。以电泳鉴定其完整性。紫外分光光度计进行定量。检测的表达检测不同处理组对人胃黏膜上皮细胞中表达的影响。,,数据用繁硎尽结果:对体外培养细胞细胞周期相关蛋白表达的影响蛋白免疫印迹检测蛋白的表达鞍追肿恿课璖缬尽转膜后,细胞空白对照组、溶剂对照组、处理结果表明,处理可以使细胞蛋白的蛋白免疫印迹检测的去磷酸化水平的蛋白分子量为,经电泳、结果表明,与对照及溶剂对照组相比,处理组中文摘要,和’
,经电泳、转膜后,细胞空白对照组、溶剂对照组、处理组均在位置出现了阳性荧光条带。以作为内参照,经图像分析系统对杂交条带进行定量分析,结果表明,与对照及溶剂对照组相比,,经电泳、转膜后,细胞空白对照组、溶剂对照组、处理组均在位置出现了阳性荧光条带。以作为内参照,经图像分析系统对杂交条带进行定量分析,结果表明,与对照及溶剂对照组相比,,经电泳、转膜后,细胞空白对照组、溶剂对照组、处理组均在位置出现了阳性荧光条带。以作为内参照,经图像分析系统对杂交条带进行定量分析,结果表明,与对照及溶剂对照组相比,处理组细胞的磷酸化水平明显增高对体外培养细胞、.
产物经%琼脂糖凝胶电泳及半定量分析达没有明显差别。给予作用螅/质水平上的表达,同时使和的磷酸化水平上升,而降低的去磷酸化水平和的表检测的表达表明,溶剂对照组和对照组细胞内的表浓度范围内,与溶剂对照组相比,细胞的表达量逐渐升高,与浓度呈显著正相关关系检测表明,溶剂对照组和对照组细胞内的表达没有明显差别。给予作用螅./浓度范围内,与溶剂对照组相比,细胞的表达量逐渐升高,,检测没有明显差别。给予作用螅/浓度范围内,与溶剂对照组相比,细胞的表达量逐渐降低,与浓度呈明显负相关关系结论:..琻,。。,
达。可以上调赴鸆虲趍水平上的表达,下调在该水平上的表达。芯拷峁崾荆琒,可影响细胞中虲谧B己头胨缴系谋达,这可能与诱导细胞发生期阻滞有关。关键词:杂色曲霉素;细胞;期阻滞:中文摘要籆籆
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