柯萨奇病毒B3致病毒性心肌炎动物模型的建立.docx

柯萨奇病毒B3致病毒性心肌炎动物
模型的建立
【关键词】病毒性心肌炎物模型柯萨奇 病毒
病毒性心肌炎的治疗一直是临床工作者非 常关注的问题［1］。建立一个稳定而可靠的 病毒性心肌炎动物模型，对治疗心肌炎的药 物筛选及药效研究是必不可少的，心肌炎动 物模型可以提供明确的病原， 进行全面的心 肌病理检查，适用于临床与基础研究。我们 在观察各种药物治疗柯萨奇病毒模型鼠的 作用中（另文报告），首先进行了 CVB3的致 病模型研究，现报告如下。
1材料和方法
实验动物与分组4周龄雄性近交系
BALB/C小鼠，体重（17 土 2） g ,购于湖北省 实验动物研究中心，所有小鼠均为 SPF级'
将35只小鼠分为2组:A组为实验组25只， B组为正常组10只。
细胞与病毒株Hep2细胞由武汉大学典型 培养物保藏中心提供。CVB3Nancy株为武汉 大学医学院病毒学研究所保存。病毒经Hep2 细胞活化增殖，CPE^ 75恕上时收获，其滴 度为 107TCID50/ ml。
模型建立动物室保持空气流通，相对湿 度在60就右，温度（22 土 2）C。注射部位常 规消毒后，腹腔注射10-5即100TCID50/ ml CVB3 ml,正常组腹腔注射等量 mmol/L磷 酸盐缓冲液ml。接种病毒时间定为第0天， 至第7天时随机从各组取 5只小鼠，于眼眶 采血后处死小鼠留取心脏，将血离心分装、 血浆冻存，将心脏冲洗称重后，用 10御醛
固定待做病理组织学检查， 剩余小鼠饲养至
第21天时，全部处死留取心脏，将心脏冲 洗称重后，用10%3醛固定待做病理组织学 检查。
心脏重量/体重比值与生存率存活达第 21天者视为存活，各组小鼠处死之前称重， 心脏称重前用滤纸吸净。
组织病理学检查 各组小鼠用10%^醛固 定后石蜡包埋切片，HE染色，镜下观察组织 病理学改变并记分。炎症细胞浸润，心肌坏 死占每张心脏切片
25耕1分，25吟50%十 2分，50吟75衙 3分，75衙 4分。
血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）的生化测定 采用TOSH旧A-40FRS动生化分析仪测定血 清CK-MB勺含量。
统计学处理方法 率的比较用x2检验，组 间计量资料采用t检验。
2结果
HW/B妣值与生存率 A与B组HW/BW匕值 结果分别为和，两组比较 P<,差异有统计 学意义。A组20只小鼠，21 d生存率为％ 第1〜第6天共死亡2只，而第7〜第12天 死亡8只，第13〜第21天仅死亡1只，死 亡高峰在第7〜第12天；B组无一只死亡。
病理学检查结果 A组小鼠心脏外膜肉眼 可见少量白色点状、条纹状、斑块状以及出 血点等。B组无此现象。CVB3^染小鼠后第 7天炎症细胞灶性浸润，分布在溶解坏死的 心肌周围（见图1）,更有意思的是发现大量 淋巴细胞围绕神经组织浸润（见图2）。
组织学检查结果第7天时从各组随机抽
取5只小鼠光镜检查，发现A组小鼠心肌均 有变性、坏死、炎症细胞浸润或有钙盐沉着， 组织评分最低分为分，最高分为
4分；B组 未发现炎症细胞浸润与心肌坏死。
心肌酶CK-MB吉果 第7天时A组小鼠为 （土）U/L , B组为（土 ）U/L，两组比较 Pv。
3讨论
本实验证明：Balb/c小鼠腹腔注射 CVB3W 毒可导致严重的心肌炎症。