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Bio-rad Gene Pulser Xcell电穿孔系统
一 Gene Pulser Xcell电穿孔系统介绍
电穿孔的过程中可以有2种波型来控制外界电压的变化，Gene Pulser Xcell可以提供2种波型，即指数波和方波。
Decay Wave（指数波）
所谓指数波的方式，就是将已经充电到指定电压的电容进行快速的放电，放电的方式是以指数的形式进行的（如上面的slide显示）。该种方式的电穿孔取决于2个参数，电场强度(kV/cm)和时间常数(ms)。在实验过程中，采用具体的电击杯调整电压即可调整不同的电场强度。此外，电容和电阻的具体值也可以在Gene Pulser Xcell的界面上进行设置。
电容器充电到预定的电压(V0)放电后，即向样品释放脉冲，细胞表面的电压随时间按指数方式下降的
电容器的电压值达到峰值释放脉冲后迅速的衰减
电场强度 E (V/cm) 是用来描述电击杯外界电场环境的一个参数（E=V/d）
脉冲时间是一般用时间常数来进行衡量 (~37% of V0，V0/e)
脉冲的时间是由电阻和电容的大小所决定的
备注：PC module作用
PC（Parallel Capacitor）模块的本质就是在放电回路中在样品上并联一套电阻。
在放电回路中设置PC模块的目的：如果实验样品具有很高的电阻值，那么脉冲就需要维持相当长的时间，这样对细胞是会有损伤的，长时间的电场作用会导致细胞的裂解。并联了PC模块后对样品而言电击是的电压并没有变化，但是PC模块起到了分流的作用，可以使得脉冲的时间常数大大减小，可有效的维持细胞的活性。并联了PC模块后，时间常数取决于该模块的电阻，电阻越小，那么放电的时间也就越短。
2. Square Wave（方波）
对于某些细胞而言，采用指数波进行实验特别容易导致细胞的死亡。对于这种细胞而言，采用方波的形式来进行电穿孔既可以进行有效的转染，又可以很好的保护细胞，维持细胞的活性。方波的形式通常用以下的参数来进行描述：电压、脉冲时间、脉冲次数和脉冲间的间隔时间。上述所有的参数都可以在Gene Pulser Xcell的操作界面上方便的设置。在实验结束后，Gene Pulser Xcell还可以显示实验中这些参数的具体值。
方波的本质和指数波是一样的，区别在于电压还没有下降为0的时候，电容器的放电已经被截止了。所有的方波都会有电压的细微下降，以其始的电压值的百分比计算。一般下降率不超过5%。
电容器的指数放电过程中被截止后就会形成方波，其时间常数远大于脉冲时间
脉冲时间就是细胞被放电的时间
脉冲是可以被反复释放的，在低压回路最多可以重复10次，在高压回路最多可以重复2次
脉冲的间隔时间就是指2个脉冲间的时间
脉冲下降是指终止电压和起始电压值之间的差值
电容器的指数放电过程中被截止后就会形成方波，但是采用不同电压的回路会形成不同的方波脉冲。
采用方波的工作原理是：对电容器进行充电后，释放脉冲到细胞上维持所需的时间，在进行第二次脉冲前需要对电容器进行重新充电。那么脉冲间的间隔就取决于电容器充电需要的时间和具体的电压，也就是说在设置脉冲间的时间时，其值不能小于电容器充电所需的时间。
采用低压回路时，那么就需要采用