第3章 细胞融合(08-08-22).ppt

第三章 细胞融合
细胞融合是指2个或2个以上的细胞融合成1个细胞的过程。人工的细胞融合开始于1950s,此后作为一门新兴技术发展非常快,应用范围也极为广泛,不仅同种类细胞间可以融合,种间远缘细胞也能融合。
细胞工程的发展是建立在细胞融合基础上的。
在2003年8月出版的《Cell Research》上,一篇论文介绍了上海第二医科大学盛慧珍教授领导的研究小组的研究成果:
“那不成人兔杂交了吗?它是人?是兔?还是半人半兔?”——伦理上的普遍质疑
他们将一位5岁男孩、两位成年男性的包皮细胞、一位60岁女性面部细胞的细胞核,放入去掉细胞核的新西兰兔卵母细胞中,成功让融合后的细胞发育到胚泡阶段,从而得到胚胎干细胞。
细胞融合不仅可用于生物学的基础理论研究,而且在生产实践上还有重要的应用价值,如目前在单克隆抗体的制备、核质关系、体细胞的遗传和发育、新品种的培养、免疫作用、疾病的治疗和性状的改良、潜伏病毒的研究等,已取得了显著的成绩。
其中最突出的就是在制作单克隆抗体方面的应用!
第二节 杂交瘤技术与单克隆抗体
第三节 细胞融合和动物新品种培育
本章讲授提纲
第一节 细胞融合的技术方法
第一节 细胞融合的技术方法
细胞融合(Cell fusion)又称为细胞杂交(Cell hybridization),现多统称为细胞杂交。
同核体(homokaryon):基因型相同的细胞融合成的杂交细胞
异核体(heterokaryon):来自不同基因型的杂交细胞
根据所用促融剂的不同,细胞融合技术主要可分为四大类:
病毒介导的细胞融合技术
化学介导的细胞融合技术
电击介导的细胞融合技术
激光介导的细胞融合技术
一、病毒介导的细胞融合技术
促融剂:麻疹病毒、副流感病毒、新城鸡瘟病毒、仙台病毒以及其他一些副粘液科的病毒
大体原理:病毒被膜中的糖蛋白含有融合蛋白(fusion protein), 既可介导病毒同宿主细胞融合, 又可诱导细胞与细胞融合。
操作繁琐;
促融效果较好
融合蛋白是副粘病毒的两种包膜糖蛋白之一,其主要功能是引起病毒包膜与靶细胞膜或被感染的靶细胞膜之间发生融合。细胞融合过程需要另一种包膜糖蛋白――血凝素-神经氨酸酶的协助。融合蛋白需要和同源性血凝素-神经氨酸酶共同表达才能显示出融合细胞的活性。
病毒
增殖
紫外线灭活
稀释
细胞悬液
细胞融合
诱导
大体操作流程
筛选