间歇性高原低氧抗心肌缺血再灌注损伤的线粒体机制研究.pdf

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间歇性高原低氧抗心肌缺血再灌注损伤的线粒体机制研究中文摘要低氧对心肌线粒体的呼吸功能、线粒体通透性转换：、线粒体嵬ǖ博士研究生：朱卫中硌指导教师：周兆年研究员目的：已有很多研究表明，间歇性高原低氧曲能显著提高心肌抗缺血，缺氧的能力，表现为显著减轻缺血再灌注后心脏舒缩功能降低，减少缺血再灌注后心律失常的发生，缩小心肌梗死面积等。但对线粒体在低氧后的心肌保护中的作用研究甚少。本工作主要研究间歇性高原和线粒体蛋白质表达的影响以及它们在抗缺血再灌注损伤中的作用。方法：雄性大鼠随机分为常氧组和间歇性高原低氧组，间歇性高原低氧组于低压氧舱接受天相当叨鹊募跹沟脱醮恚刻低氧暴露结束后，对照组和间歇性高原低氧组大鼠利用嗔鞲粗菩肌缺血种／再灌注分钟鹕四Ｐ停鄄旒锹夹墓δ苤副甑谋浠ḿ觳馊毖T俟嗪笮募」Ｋ烂婊徊钏倮胄姆ǚ掷胱笫倚募∠赴吡Ｌ澹检测线粒体在不同浓度的介质中加的变化；测定细胞色素酉吡Ｌ逍孤┏龅牧浚环掷胄募∠赴胕猯作为的荧光指示剂，检测模拟缺血再灌注过程中细胞内和线粒体内钙的变化及心肌细胞舒缩活动的变化：用蛋白质组学方法研究间歇性高原低氧训练后心肌线粒体内蛋白质表达的变化。结果：在离体心脏嗔魇笛橹校鄄斓饺毖T俟嘧⒁种屏顺Ｑ组大鼠心肌功能的恢复，间歇性高原低氧可以促进缺血再灌注后心功能的恢复，增加痙和档土薒；同时还减少了缺血再灌注引起的心肌梗死面积；在复灌最初分钟用特异性开放剂处理可以使这些保护性效应消失。间歇性高原低氧可降低缺血再灌注过程中心肌细胞内钙超载程度，复灌初用砜擅飨栽黾痈垂嗍卑屎拖吡Ｌ迥诟瞥厮
功能恢复提供能量基础；另一方面，间歇性高原低氧训练后在缺血再平；间歇性高原低氧还可显著延迟心肌细胞的开放和细胞挛缩，同样使之消失。间歇性高原低氧可减轻引起的离体线粒体膨胀，墒辜歇性高原低氧组的这种作用消失；结果表明，泄漏到线粒体外的细胞色素牧坑隿ǘ瘸烧喙兀嗤珻迸ǘ认拢市P愿咴脱踝樾漏的细胞色素牧肯灾儆诔Ｑ踝椋皇褂肁后，两组大鼠心肌线粒体泄漏出的细胞色素牧棵挥邢灾钜臁在缺血前用的特异性抑制剂籋硇脑种涌赏耆种萍歇性高原低氧对心肌缺血再灌注时左心室功能的改善；模拟缺血显著升高常氧组大鼠心肌细胞内钙和线粒体内钙的水平；而间歇性高原低氧训练则大大减轻了细胞和线粒体内钙的水平，这些保护作用可被籋耆种啤在线粒体蛋白质组学研究中发现，间歇性高原低氧训练可以改变线粒体内与物质和能量代谢有关的酶的表达发生适应性变化。间歇性高原低氧训练增加苹果酸脱氢酶、乙醛脱氢酶、细胞色素乖柑蜓堑ノ弧⑺澄谕匪崦浮⒌缱哟递黄素蛋白堑ノ缓虯合成酶吹鹊谋泶铮跎偬於彼岚被R泼等的表达；间歇性高原低氧训练增加了线粒体基质内的一种分子伴娘一一热休克蛋白一一的表达；另外，间歇性高原低氧还提高了一一种抗活性氧类的蛋白质的表达。结论：上述结果表明，间歇性高原低氧可减轻缺血再灌注引起的心功能损伤，线粒体结构的完整及其功能的维持在缺血后心室功能恢复中起重要作用。一方面，间歇性高原低氧训练降低了对钙的敏感性，减少其在缺血再灌注时的开放，维持线粒体结构的完整，促进复灌时线粒体功能的恢复，为心肌灌注中激活，能有效地降低细胞内钙的超载，从而进一步减少的开放，减轻了心肌细胞的损伤程度；另外，间歇性高原低氧影响了线粒体内一些蛋白质表达的变化，可能在间歇性高原低氧心肌保护作用机制中具有重要意义。关键词：间歇性高原低氧；心脏；线粒体；线粒体通透性转换孔；线粒体通道；；缺血再灌注；线粒体蛋白质组硼剐募∪毖<龉嘧⑺鹕说南吡Ｌ寤
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第一部分前言心脏病是威胁人类健康最常见的疾病之一。，其发病率在我国也居首位。当心肌供血量明显减少，或心作功负荷超过心肌最大供血能力时，都会引起心肌缺血，导致心肌损伤，其损害程度与缺血时间长短及残存血流量多少有关，短期不完全性缺血一般引起可逆性损害，而长时间