烟碱对帕金森病大鼠保护效应及作用机制研究.pdf

华中科技大学
硕士学位论文
烟碱对帕金森病大鼠保护效应及作用机制的研究
姓名:温璐
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:曹学兵;孙圣刚
20080501
华中科技大学硕士学位论文

英文缩略语表
英文缩写英文全名中文译名
PD Parkinson disease 帕金森病
NGF Nerve growth factor 神经生长因子
DA Dopamine 多巴胺
DOPA 3,4-dihydroxyphenylalanine 3,4-二羟苯丙氨酸
HVA Homovanillic acid 高香草酸
CA Catecholamine 儿茶酚胺
L-dopa Levodopa 左旋多巴
6-OHDA 6-hydroxydopamine 6-羟多巴胺
TH Tyrosine hydroxylase 酪氨酸羟化酶
nAChR Nicotinic acetylcholine receptor 烟碱乙酰胆碱受体
SN Substantia nigra 黑质
mfb Medial forebrain bundle 前脑内侧束
APO Apomorphine 阿朴吗啡
PBS Phosphate-buffer saline 磷酸盐缓冲液
OD Optical density 光密度
DAB 3,3'-diaminobenzidine 3,3'-二氨基联苯胺
dNTP deoxy-ribonucleoside triphosphate 三磷酸脱氧核(糖核)苷
RNase ribonuclease 核糖核酸酶
RT-PCR reverse transcrip- polymerase chain reaction 逆转录聚合酶链反应
MAO monoamine oxidase 单胺氧化酶
BH4 tetrahydrobiopterin 四氢叶酸
CAMP Cyclic Adenosine monophosphate 环磷腺苷
MPTP 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢
吡啶

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前言
帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种常见的神经系统变性疾病,主要临床
特征为静止性震颤、强直、动作迟缓和姿势不稳,病理基础是中脑黑质多巴胺能神经
元变性脱失,从而引起纹状体多巴胺(DA)含量的下降。由于黑质纹状体的DA系统功能
减弱,乙酰胆碱、脑啡肽等递质系统失去制约而出现功能相对增强,导致运动调节失
控。当今社会日趋老龄化,PD的发病率也在逐年上升,其患病率在65岁以上人群中为
1% ~3%,并随年龄增长而增高。本病慢性进展,致残率极高,其发病机制还不很
明了,对PD的治疗仍以对症治疗为主,虽然左旋多巴替代治疗可以减轻大部分临床症
状,但长期使用左旋多巴会出现疗效减退、症状波动、运动及精神障碍,且仍无法阻
止或延缓多巴胺能神经元的进行性缺失。因此,深入研究PD的病因并进而指导治疗,
已成为临床工作的迫切要求。
6-OHDA是一种选择性破坏儿茶酚胺神经系统的神经毒素,是目前最常用于制备帕
金森模型的工具药。当6-OHDA局部注射到黑质或纹状体后,某些胺类摄取系统误将它
作为内源性儿茶酚胺(DA、去甲肾上腺素)来利用。在自主神经系统中,6-OHDA可引
起长达几个月的去甲肾上腺素的耗竭并选择性破坏去甲肾上腺素能神经末梢。外周给
6-OHDA不能通过血脑屏障,必须定向注射到大脑黑质[1,2]。在脑黑质或黑质纹状体通
路内注射小剂量的6-OHDA ,24小时后多巴胺能神经元开始变性,2-3天后纹状体的多
巴胺的水平开始下降[3]。并且会产生进一步的生物化学和组织化学变化如儿茶酚胺代
谢产物减少、四氢吡啶(TH的辅助因子)减少,突触前膜再摄取儿茶酚胺的位点数目
减少,TH免疫组化阳性反应神经元减少等,产生类似PD的症状、进行性过程及病理变
化,现已成为PD研究的常用实验动物模型。因此,通过6-OHDA制备PD模型,可以进一
步了解PD的发病机制及发展过程。
目前大量的研究表明,吸烟和PD发病之间存在着负相关关系,吸烟可以减少50%
以上的PD发生[4-6]。烟草中的主要成分为烟碱,又名尼古丁,基础研究显示,慢性烟
碱刺激可减轻MPTP引起的纹状体DA、DOPAC、HVA的降低及TH阳性纤维的损害,对PD小
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鼠具有保护效应[7];临床实验也观察到,PD患者在吸烟过程中其震颤、僵直、运动减
少等症状减轻[8] 。Ke