实验十八 食品中着色剂的测定.doc

实验十八   食品中着色剂的测定
一、目的与要求:
1、明确测定各类色素的原理与方法。
2、通过此实验掌握纸层析定性法与提纯色素的定量法。
二、原理:
    聚酰胺是具有二极性的化合物,水溶性酸性染料在酸性条件下被聚酰胺吸附,而在碱性条件下解吸附,再用纸色谱法或薄层色谱法进行分离后与标准比较定性、定量。
    三、试剂:
    1、聚酰胺粉(尼龙6)
2、硫酸1:1 0
3、甲醇—甲酸溶液:6:4
4、甲醇
5、20%柠檬酸溶液
6、10%钨酸钠溶液
    7、石油醚:沸程60-90℃
    8、海砂:先用l:10盐酸煮沸15min,用水洗中性,再用5%氢氧化钠溶液煮沸15min,再于105℃干燥,贮于具玻璃塞的瓶中,备用。
    9、乙醇-氨溶液:取1毫升氨水,加70%乙醇至100毫升。
10、50% 乙醇溶液
11、硅胶G。
12、PH6的水:用20%柠檬酸调节至PH 6。
13、盐酸: 1:10
14、5%氢氧钠溶液
15、碎瓷片:处理方法同海砂
16、展开剂
    a、正丁醇-无水乙醇-1%氨水(6:2:3):供纸色谱用。
    b、正丁醇-吡啶-1%氨水(6:3:4):供纸色谱用。
    c、甲乙酮-丙酮-水(7:3:3):供纸色谱用。
    d、甲醇-乙二胺-氨水(10:3:2):供薄层色谱用。
    e、甲醇-氨水-乙醇(5:1:10):供薄层色谱用。
    f、%柠檬酸钠-氨水-乙醇(8:1:2)供薄层色谱用。
    17、色素标准溶液{以下商品作为标准以100%计。
    胭脂红:纯度60%;苋菜红:纯度60%;柠檬黄:纯度60%;靛蓝:纯度40%;日落黄:纯度60%,亮蓝;纯度60%。
    ,用PH6的水溶解,移入100毫升容量瓶中并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1毫克商品色素。靛蓝溶液需在暗处保存。
    18、色素标准使用液:,分别置于50毫升容量瓶中,加PH6的水稀释至刻度。。
四、仪器:
1、分光光度计
2、微量注射器或色素吸管
3、展开槽,25 X 6 x 4cm
4、层析缸
5、滤纸、中速滤纸,纸色谱用
6、薄层板:5 X 20em
    7、电吹风机
    8、水泵
    五、操作方法:
    1、样品处理
    A、果味水、果子露、汽水:,汽水需加热驱除二氧化碳。
    B、配制酒:,加碎瓷片数块,加热驱除乙醇。
    C、硬糖:蜜饯类,淀粉软糖:,加30毫升水,温热溶解,若样液PH值较高,用20%柠檬酸溶液调至PH4左右。
    D、含蛋奶的样品
    (1)奶糖:,加30毫升乙醇-氨溶液溶解,置水浴上浓缩至约20毫升,立即用1::l0硫酸,加1毫升l0%钨酸钠溶液,使蛋白质沉淀,过滤,用少量水洗涤,收集滤液。
    (2)蛋糕类:,加海砂少许,混匀、用热风风干样品(用手