内毒素实验凝胶法.ppt

细菌内***检查法(凝胶法) 苏州大学卫生与环境技术研究所 1细菌内***?细菌内***是革兰氏阴性菌细胞壁的产物,它主要化学成分是脂多糖。细菌在生活状态下不会释放出来,只有当细菌死亡后才会表现出毒性。?内***为外源性热原物质,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。 2细菌内***的单位? EU 称为“内***单位”,是专指内***的活性单位。? IU 称为”国际单位”是经由国际协商规定出的标准单位。? 3细菌内***的生物活性?1、致热性。 2、致死性毒性。 3、白细胞减少。 4、激活凝血系统。 5、降低血压, 休克。 6、 Shwartzman 反应。 7、刺激淋巴细胞有丝分裂,等等。 4细菌内***的耐热性?细菌内***具很强的耐热性,一般的高压灭菌不能去除细菌内***,需 250 ℃至少 30 分钟以上的干热灭菌才能使其灭活。 5实验用器具的处理内***试验中使用的器皿都要经过处理去除可能存在的外源性内***。?耐高温的玻璃器皿等置于电热干烤箱内 180 ℃干烤至少 2h 或者 250 ℃干烤至少 30 分钟; ?塑料器皿置于 30 %双氧水中浸泡 4h ,再用细菌内***检查用水充分冲洗, 60 ℃烘干备用。 6细菌内***与热原的区别与联系?热原包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。?一般来说内***是热原,但热原不全是内***。?在药品生产质量管理规范( GMP )条件下,药品生产的质量控制一般可以接受的观点是:不存在细菌内***意味着不存在热原。 7细菌内***检查法概念?本方法是利用鲎试剂检测由革兰氏阴性菌产生的细菌内***,以判断供试品中细菌内***的限量是否符合规定的一种方法。细菌内***检查法包括凝胶法和光度测定法,由于凝胶法操作简单快捷、灵敏度高,并且药典规定当不同试验方法的结果存在争议时,除另有规定外,以凝胶法为准,所以凝胶法被广泛应用。 8凝胶法概念?凝胶法是通过鲎试剂与内***产生凝集反应的原理来检测或半定量内***的方法。 9凝胶法中用到的仪器和器皿 1. 超净工作台? 10