DNA重排检测方法.ppt

DNA重排检测方法
一、形态学观察
二、细胞遗传学
如：染色体核型分析、染色体显带等
三、分子细胞遗传学
如：荧光原位杂交
四、分子生物学
如： Southern杂交，PCR及相关技术等
DNA重排检测方法
一、形态学观察
例子：
上个世纪40年代科学家B．McClintock
观察研究玉米籽粒和叶子时发现有颜色变化。 这种颜色变化是由遗传结构的基本改变引起的，从而导致转座子的发现。
肿瘤细胞与正常细胞
肿瘤细胞中基因重排现象非常普遍，遗
传结构的改变引起表型的改变。因此从
形态学上可以鉴定肿瘤。
DNA重排检测方法
二、细胞遗传学
染色体核型分析、染色体显带
一个物种的染色体核型及带型是稳定的
染色体核型分析：观察中期染色体，初步分析染色体有无较大片段的缺失、断裂、易位、及附加
常规核型分析
荧光核型分析
光谱核型分析(Spectral karyotyping, SKY)
DNA重排检测方法
光谱核型分析原理(Spectral karyotyping, SKY)
　　 1996 年 Schroch等首次描述了SKY技术。应用5种荧光素同时标记24条人染色体，制成染色体涂染探针，应用Fourier光谱仪，CC成像和荧光显微镜进行检测分析，经计算成像处理，46条染色体形成具有不同颜色的核型影像,可用以分析各种染色体异常。
优势：
特异性和分辨率比传统的显带技术高，它
可以检测到 碱基的转位
一次杂交即可分辨人的24条染色体
DNA重排检测方法
人染色体光谱核型分析
DNA重排检测方法
乳腺癌细胞染色体复杂的畸变
DNA重排检测方法
：
C-banding 主要染异染色质
R-banding 与C-banding 相反，主要染常
染色质区域
G-banding 是Giemsa 染色结果，产生深
浅不同的条带
Q-banding 是用喹丫因（quinacrine）染
色得到的荧光条带，带型与G带相似
DNA重排检测方法
G-带
c. 正常染色体
末端缺失 d. 末端倒位
末端单向易位 e. 着丝粒周倒位
DNA重排检测方法
G－带显示人急性骨髓白血病异常染色体 9、10、11染色体间易位，右为异常染色体
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