抑制PAR4表达对肠癌细胞SW620恶性表型影响.pdf

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惫乙学位论文作者签名:/脚铜宁签字日期:≯¨学位论文版权使用授权书学位论文作者签名:/上彰矿呷签字日期:晗缭日旯隆逝姿盘鲎论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权逝姿态堂可以将学位论文的年;月本学位论文作者完全了解有权保留并向国家有关部门或机构送交本全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签名:,击日—’
,毕生难忘。本论文从选题、设计、实验到结果分析到论文的撰写、修改等过程无不凝聚着恩师的大量心血。曹老师敏锐的洞察力、渊博的学识、严谨的科学精神及求是的工作作风,永远是我学的楷模。衷心感谢浙江大学医学院附属邵逸夫医院中心实验室张行主任、王琦老师,陈大方老师、陈萍老师、林晓霞老师等为本实验的完成提供的大力帮助和良好的实验条件衷心感谢浙江大学医学院章静、金科涛、何奎锋、褚丽莎、郭君兰等同学的友好帮助和大力支持特别感谢父母多年来在我的求学路上给予我精神和生活上无限关爱和极大的支持和奉献感谢答辩委员会和参加论文评阅的专家和老师们为本论文所作的指导和帮助感谢所有关心和帮助过我的朋友再次致以深深的谢意浙江大学硕士学位论文致谢
抑制表达对肠癌细胞裥员硇偷挠跋浙江大学医学院硕士研究生导师中文摘要肿瘤学韩娜曹江恶性肿瘤是迄今严重危害人类健康的重要疾病之一,侵袭和转移是恶性肿瘤两个关键的生物学行为,也是影响肿瘤患者临床预后的主要因素,在相当长的时间内恶性肿瘤的侵袭和转移仍然是人类面临的亟待解决的重大基础和临床问题。肿瘤的侵袭和转移是一个多步骤多阶段的复杂过程,受众多相关因素的共同影响。在这些相关因素中,各种蛋白酶在肿瘤的侵袭转移中发挥着重要的作用。以往人们对蛋白酶的研究主要侧重于其降解细胞外基质,从而促进肿瘤细胞的侵袭和转移,近年的研究表明,蛋白酶还能通过激活各种信号传导途径、调控相应的基因表达而参与肿瘤发生发展的整个过程。蛋白酶对基因表达的调控主要是通过位于细胞膜表面的蛋白酶激活受体琍进行的。黜是一类带隹缒で淖陨带有配体的特殊的鞍着剂J芴,銷端经特异性蛋白酶水解后成为自身配体而被活化,并通过与其偶联的鞍酌触发一系列信号传导,进而调控下游相应基因的表达。目前已明确的有种,其中產是近年来发现的一个亚型,是一个低亲和力的凝血酶受体。研究表明,在乳腺癌、肝癌、肠癌、前列腺癌、软组织肉瘤、星形细胞瘤等多种恶性肿瘤细胞中表达升高,根据这些情况,可以推测表达水平与这些恶性肿瘤的生物学行为相关,但在不同肿瘤细胞中表达升高的原因及其与肿瘤细胞的生长、侵袭转移等恶性表型的关系,目前的研究均未涉及。產浙江大学硕士学位论文Ⅱ
托睮酶酶切鉴定转化子凸孝蛩盖屑ǎ土孝蛩盖校强寺∮诰前体片段,克隆至靥迳希肂本课题以作为研究对象,以人肠癌细胞DP停捎萌斯技术对进行表达抑制,研究抑制表达对肠癌细胞生长、:邢蛞种芇泶锏娜斯表达载体的构建:根据的菘饣竦萌薖膍蛄械淖柿登录号一猛缱试://..痗/甤垂选择合适的人工序列,通过两次┰龌竦的人工并经庑蛑な怠将经测序证实正确的人工前体序列进行串联连接,得到龃联连接的人工前体序列后,,将正向插入片段的表达载体命名为.×.甈泶镆种贫許细胞生长运动能力的影响细胞转染:利用玴表达载体转染人肠癌细胞珿秆】剐韵赴寺。琖检测表达,获得稳定转染人工表达载体的赴MH緋赵靥至赴⑸秆剐韵赴寺。崛』蜃镈,以ḿㄎ定转染细胞。ḿ觳釶泶镆种贫許细胞在体外生长能力的影响:将人工表达载体稳定转染组/..空载体转染对照组/.臀醋H径哉兆分别接种于孔板,培养欤覯孵育,用溶解结晶,在处读取吸光度值,绘制生长曲线。结果显示,转染人工表达载体的细胞与两个对照组相比,生长呈明显减慢的趋势,,结果显示,转染人工浙江大学硕士学位论文中文摘要
蠡徽5暮バ∨QG宓腞嘌海郊友雇吩诹装逯谢表达体的赴娜砬碇寺⌒纬墒坑肓礁龆哉兆橄啾染邢灾钜划痕试验检测表达抑制对赴逋馇ㄒ颇芰Φ挠跋欤将处于指数生长期的上述三组细胞分别接种于六孔板,加丝裂霉素痕,分别培养、天,在倒置显微镜下观察并记录划痕边缘细胞向空白区扩散运动情况。结果显示在第天各组细胞无明显差