蓝氏贾第鞭毛虫、微小隐孢子虫动物感染及其基因检测研究.pdf

河北医科大学
硕士学位论文
蓝氏贾第鞭毛虫、微小隐孢子虫动物感染及其基因检测的研究
姓名:罗晓冰
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:陈小宁;卢思奇

令人满意。∥蓝氏贾第鞭毛虫、微小隐孢子虫动物感染及其基因检测的研究腹泻和吸收不良为主要症状。硕娴幕嵝愿腥疽两种原虫的基因检澳辛颂教帧椒ū臼笛橛肅/小鼠建立了满意的贾第虫感中文摘要对于贾第虫病和隐孢子虫病的深入研究,有赖于其动物模型的建立。以往建立贾第虫动物模型的尝试甚多,先后使用的动物有大鼠、猫、犬和家兔等,但多不目前,对这两种原虫感染的检测,主要采用粪检方法。然因虫体微小且多与标本内其它物体相混淆,尤其当患者粪便中排囊量少时,漏诊机会极多。故此探寻一种敏感性强、特异性高的诊断方法实属必要。本研究对染动物模型,用人源蓝氏贾第鞭毛虫河北株和江苏株的包囊分别感染两组∈螅占染鼠粪便,用蔗糖梯度离心法分离纯化包囊,计算排囊数量,分析排囊规律;观察小肠病理组织学改变。目的蓝氏贾第鞭毛虫甶騁.,简称贾第虫臀⑿∫孢子虫猻,简称隐孢子虫引起人体贾第虫病和隐孢子虫病的重要病原体,二病以的腹泻是加速艾滋病,颊咚劳龅闹匾T蛑弧殖
本实验用昆明小鼠进行了微小隐孢子虫动物感时所排粪便含包囊数最高可达个儋粪。小肠粘和牛源微小隐孢子虫长春株,在饮水中添水搅匀后过筛拙段眦,用蔗糖梯度密度离心法分离纯化卵囊。āā稀释。根据贾第虫磷酸丙糖异构基因合成两对特异性引物,采用际分别扩增各个稀释度的样本。结果接受具有活力的霭业恍∈和分别为只竦酶腥荆慌拍页始湫P裕中间歇性排囊者为只%柿耘拍艺只%拍仪狈谖患湫P耘拍抑卸戏直鹱痈染第恋不等。排囊高峰期为感染第。膜出现表面分泌物增加,间质充血、水肿,炎性细胞浸润,粘膜坏死脱落等病理变化。接受具有活力的个卵囊的只小鼠分别为只竦酶腥尽T谝刑砑拥厝松的方法,延长了模型的存在时间,比较方便地建立了免疫小鼠模型。实验中出现感染小鼠的死亡现象,进一步验证了目前普遍认为的“隐孢子虫感染在免疫抑制或染的研究,。分别于感染后,收集小鼠粪便,加取分别于动物感染后第、天收集粪便标本,采用酚一***仿法提取总=崛∫悍直鹱酶瑃蚝臀⑿∫咦虫中文摘要
率组低于镜检结果,~、。哂诰导旖峁纷鉶“缺陷的宿主体内可引起严重慢性感染甚至死亡”的结论。结论∈蠖岳妒霞值诒廾ǔ嬗泻芨叩囊赘两组腥拘∈蟮呐拍沂俊⒎治雠拍夜实验结果显示,贾第虫阳性样本均被扩增出相应基贾第虫感染的∈蠓啾阊靖鞲鱿∈投的觳饨峁砻鳎炕蟮母鞲鱿∈投妊镜腜检测阳性率随着稀释倍数的增加而增高。各个稀释度样本阳性率,进行卡方检验,。组觳庋粜月矢哂觳馐笛榻峁砻鳎鞲鱿∈投萈检测阳性率随着稀释倍数的增加而增高;各个稀释度样本阳性率,觳庋粜月屎途导旖峁允荆篊/小鼠。榈陀诰导旖峁幌∈投高于镜检结果。小鼠感染隐孢子虫第、第⒌的觳庋粜性,可将之作为蓝氏贾第鞭毛虫感染动物模型。和律、小肠病理组织学改变均无显著性差异,显示来源于不同地理位置的人体蓝氏贾第鞭毛虫虫株感染同种动物,其感染结果如排囊数量、规律等特点基本相同,而与虫株的地理位置无关。因的一ざ鹊钠危咦映嫜粜匝揪焕┰出相应基因的一ざ鹊钠巍ā组的觳庋粜月省隐孢子虫感染的小鼠粪便样本各个稀释度的进行卡方检验,~、。镻检测阳性率高于“组的觳庋粜月省感染第、第⒌的霳月、~、中文摘要
关键词蓝氏贾第鞭毛虫微小隐孢子虫。动物模型。昆明小鼠对微小隐孢子虫有很高的敏感性,可作为微小隐孢子虫感染动物模型。接受贾第虫和隐孢子虫感染动物的粪便样本在经系列稀释和纯化后,可以使觳庋粜月视胁煌潭鹊提高。∈昆明小鼠贾第虫磷酸丙糖异构酶基因聚合酶链式反应中文摘要、//,、
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