神经生长因子在大鼠牙髓机械刺激后表达变化研究.pdf

中文摘要
前言
了神经生长因子是年发
现将小鼠肉瘤组织移人鸡胚体壁可以使移植区感觉神经节数增加
后,一和发现的一种可在血液中扩散的因子。它由靶
组织产生,与支配靶组织的神经元轴突末梢的膜受体特异结合,形
成复合物进人轴浆,经逆行转运到胞体和核。在此过程中诱发一
系列生物效应。
是神经系统最重要的生物活性分子之一,它是交感神经
元、感觉神经元和中枢部分胆碱能神经元的营养因子。有实验显
示不仅参与大鼠牙髓神经纤维生长发育,而且对牙冠外型发
育起重要调节作用。并且在牙髓感觉神经纤维的生长发育
中起重要促生长作用。其次,还影响非神经系统,如免疫、造
血、生殖、内分泌等系统的功能。
目前人们对在牙齿发育中作用报导很多,而在牙健受损
伤、炎症及修复过程中的研究,特别是应用免疫组化方法直接检测
牙髓损伤、炎症修复中的表达变化国内尚未见报道,而对于
在牙髓及三叉神经节中表达的相互关系,国内外也无报导沙
本研究的目的是利用免疫组化方法研究牙齿受到机械刺激后
牙髓中的表达变化,以及在牙髓和三叉神经节中表达的相互
关系。
材料与方法
只大白鼠被用来观察双侧上领磨牙受机械刺激后的变化,
只用于正常对照,只受刺激后立即观察只鼠受刺激后天
观察,另只刺激后天观察。达到所要求的天数后,鼠被处死,
应用的多聚甲醛液心脏灌流,取上领骨及三叉神经节,上领骨
需经脱钙处理,之后将上领骨及三叉神经节置于的蔗糖磷酸
盐缓冲液中脱水,℃过夜,待组织块沉底,经包埋,使用恒冷
切片机切片,厚度为,矢状连续切片张,其中张进行免疫
组化染色,另张做染色。使用光镜观察在神经节及牙
髓中的分布,并使用一显微图象分析仪测定三叉神经节及
牙髓中的阳性细胞和阳性部位的灰度值光强度,结果进行
统计学分析。
结果
正常对照组免疫组化染色后可见三叉神经节细胞中有
个别细胞染色阳性,牙髓中染色阴性。染色见造牙
本质细胞排列整齐。
小时组三叉神经节中阳性细胞增多,牙髓中
表达为弱阳性,染色可见牙髓中造牙本质细胞排列紊乱。
天组三叉神经节中阳性细胞达到最多,且染色
最深,牙髓中强阳性表达,主要分布在成牙本质细胞层冠方,
在相应牙本质小管中可见阳性着色,同时牙髓中造牙本质细胞排
列紊乱,并出现空泡性变。
天组三叉神经节中阳性细胞明显减少,牙髓中留
表达弱阳性,染色可见牙髓中造牙本质细胞排列较正常。
、图象分析检测各组大鼠三叉神经节中及牙益中阳性细胞和
阳性区域的灰度值,经统计学分析结果为机械刺激后天组三又
神经节及牙髓中阳性细胞和部位灰度值明显低于其它各组,小
时组和天组灰度值略低于正常组。
讨论
神经生长因子作为神经营养因子
家族最先发现的成员,是神经系统最重要的生物活性分子之一。
兼有神经营养因子与促神经突起生长因子双重作用,它能促
进外周感觉和交感神经元及中枢胆碱能神经元的存活并诱导神经
元的分化和成熟及维持其生理功能。对神经细胞的生长发育、分
化、发挥调节作用,是参与神经再生和修复的重要因素。有实验显
示不仅参与大鼠牙髓神经纤维生长发育,而且对牙冠外型发
育起重要调节作用。而且在牙髓感觉神经纤维的生长发育
中起重要促生长作用。
牙髓炎、牙体损伤及过敏等的主要临床症状以及预后都与牙
髓中的神经递质密切相关,炎症组织的修复过程在很大程度上可
看作是组织发育过程的重复。本实验中在正常对照组牙髓
中表达呈阴性,机械刺激后小时组和天组的三叉神经节和牙
髓内阳性细胞和阳性部位的灰度值较正常组低,即损伤后即
刻和天时,的分泌明显增加,损伤天后表达开始减弱,此
结果与在牙胚发育中表达强而在成熟牙齿中表达弱的规律
相一致。牙髓神经的胞体在三叉神经节,后投射到尾侧亚核,换元
后上行投射至丘脑,在丘脑再次换元,最终投射到大脑皮层。三叉
神经节中小时组、天组中的阳性细胞灰度值都比正常组
明显减低,说明损伤后牙髓组织分泌的同时,三叉神经节中
的细胞也分泌,由于牙齿损伤后牙髓的靶细胞产生的量
增加,同时牙髓神经末梢向神经节中逆行转运,经轴突转运
到上级神经元的量也增多,同时神经元和胶质细胞也可合成
,因而使节中明显增多,所以牙齿损伤后的不同时期
在三叉神经节中会有不同表达。天组与其它各组相比灰度
值明显降低,有显著性差异,说明此时神经节中阳性细胞数量最
多,与此时牙髓中的反应相吻合。随着反应的减弱,到第天时三
叉神经节中阳性细胞数量已接近正常水平,即天组与正常
组间无显著性差异,而此时牙髓中灰度值还没有恢复正常,可能是
由于三叉神经节是牙髓神经的上级神经元,同时三叉神经节并没
有直接受